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一、名词解释

1． Edman 降解。

【答案】Edman 降解又称苯异硫氰酸酯法，

是指从肽链的游离的

列的过程。末端测定氨基酸残基的序末端 氨基酸被PITC 修饰，然后从肽链上分离修饰的氨基酸，再用乙酸乙酯抽提后，可用层析等方法鉴定。余下一条 缺少一个氨基酸残基的完整的肽链再进行下一轮循环。

2． 生物转化作用。

【答案】生物转化作用是指机体将体内的非营养物质（激素、神经递质、药物、毒物等及肠管内细菌的腐败产物）在肝脏进行氧化、还原、水解和结合反应，使这些物质生物活性或毒性降低甚至消除的过程。

3． 氧化磷酸化。

【答案】氧化磷酸化是指在底物脱氢被氧化时，电子或氢原子在呼吸链上的传递过程中伴随ADP 磷酸化生成A TP 的作用。氧化磷酸化是生物体内的糖、脂肪、蛋白质氧化分解合成A TP 的主要方式。

4． DNA 二级结构。

【答案】DNA 的二级结构是指两条DNA 单链通过碱基互补配对的原则，所形成的双螺旋结构。

5． 酶原的激活。

【答案】有些酶在细胞内合成和初分泌时，并不表现有催化活性，这种无活性的酶的前身物称为酶原。酶原的激活是指在一定条件下，受某种因素的作用，酶原分子的部分肽键被水解，使分子结构发生改变，形成酶的活性中心，无活性的酶原转化成有活性的酶的过程。

6． 可逆沉淀反应。

【答案】可逆沉淀反应，又称不变性沉淀，是指在发生沉淀反应时，蛋白质虽已析出，但是其分子内部结构未发生显著变化，沉淀因素去除后，能再溶于原来的溶剂中的沉淀反应，如盐析作用。

7． 丝氨酸蛋白酶。

【答案】丝氨酸蛋白酶是指活性部位含有在催化期间起着亲核体作用的丝氨酸残基的蛋白酶。

8． 氢键（hydrogen bond）。

【答案】氢键是稳定蛋白质和DNA 二级结构的主要化学键。由电负性强的原子与氢形成的基团如N-H 和O-H 有很大的偶极矩，成键电子云分布偏向负电性大的原子，使正电荷的氢原子在外侧裸露。当带正电荷的氢原子遇到另一个电负性强的原子时，就产生静电引力，而形成氢键：X-H „Y 。

二、问答题

9． 碘乙酸是有效的巯基烷化剂，能抑制糖酵解途径的特定步骤。写出碘乙酸抑制糖酵解的反应，包括酶和辅酶，以及为什么碘乙酸可以抑制该步反应。

【答案】甘油醛-3-

磷酸

二磷酸甘油酸催化该反应的酶是甘油醛-3-磷酸脱氢酶，其活性中心的巯基能与底物形成共价中间物，而碘乙酸与该巯基的结合将阻止这一共价中间物的形成，使甘油醛-3-磷酸不能被氧化，结果导致糖酵解途径被抑制。

10．在 下，水解成和的平衡常数为求该反应的

【答案】

根据公式代入已知数据，则得

11．对于表达载体有何要求？

【答案】

表达载体如质粒，具有所有正常克隆载体的组成（如复制起始点，可供选择的

聚标记，多克隆位点），而且它还具有使插入的DNA 被转录的能力。它具有RNA 聚合酶，如

合酶的启动子，以及终止序列。这些都位于多克隆位点附近，这些载体与可以产生T7RNA 聚合酶的细胞系一起使用。

12．在大肠杆菌DNA 分子进行同源重组的时候，形成的异源双螺旋允许含有某些错配的碱基对。为什么这些错配的碱基对不会被细胞内的错配修复系统排除？

【答案】大肠杆菌在进行错配修复的时候，根据母链和新生链的甲基化程度不同而识别出新生链上错配的碱基，再将新生链上错误的碱基切除，而不会切掉母链上正确的碱基。在DNA 进行同源重组的时候，形成的异源双螺 旋尽管会含有某些错配的碱基对，但异源双螺旋的两条DNA 链上都是高度甲基化的，因此这些错配的碱基对不 会被细胞内的错配修复系统排除。

13．丙酰CoA 是糖异生的前体，它对于牛特别重要。在羧化酶的催化下，它被转变成D-甲基丙二酸单酰CoA ，反应式为：丙酰CoA ，反应式为：D-甲基丙二酸单酰（2）有人认为，动物不能固定

又以

（3）甲基丙二酸单酰甲基丙二酸单酰琥珀酰CoA 。 然后，一种差向异构酶和变位酶将D-甲基丙二酸单酰CoA 转变成TCA 循环中的中间物——琥珀酰（1）写出其他两种与丙酰CoA 羧化酶最为相似的羧化酶的名称。 是因为早期引入到生物分子中的C 一般在后期的反应中的形式丢掉。为什么羧化酶催化的反应对动物的生物合成途径十分有用？ 引入到丙酰CoA 则不一样，因为引入的C 保留在琥珀酰CoA 分子之中，这难道意

到糖类吗？为什么？ 味着牛能通过糖异生从丙酰CoA 净固定

（2

） 【答案】（1）乙酰CoA 羧化酶、丙酮酸羧化酶。它们都需要生物素，具有相同的反应机制。被引入生物分子，充当好的离开基团（由羧化酶催化），有利于驱动生物合成途径

激活乙酰CoA , 然后又释放出来驱动后面碳链延伸的反应。

于是，

后面的反应。例如

，（3）琥珀酰CoA 是TCA 循环的中间物。为了转变成葡萄糖，它必须沿着TCA 循环，转变为草酰乙酸。然后形成的草酰乙酸成为PEPCK 反应的底物，形成PEP 的同时，释放

仍然没有净的转变成糖。丙酮酸羧化酶与此没有本质的差别，其产物是草酰乙酸，也是TCA 循环的中间物，而草酰乙酸不一定非要转变成糖。丙酰CoA

羧化酶特别之处在于被它激活的在后面的阶段被释放。

14．三羧酸循环的中间物一旦参加生物合成，使其浓度降低，因而影响TCA 环的进行，生物体是如何解决的？

【答案】通过草酰乙酸的回补反应来维持，主要有3条途径：丙酮酸的羧化、PEP 的羧化、天冬氨酸和谷氨酸转氨作用。

15．请解释脂肪肝产生的原因？

【答案】脂肪肝是过多的甘油三酯在肝组织积存。正常情况下，甘油三酯与磷脂、载脂蛋白等结合成VLDL 分泌入血，如果磷脂合成原料缺乏，如必需脂肪酸、胆碱缺乏，甲基化作用障碍，甘油三酯不能形成VLDL 释出肝细胞，在肝细胞内积存而形成脂肪肝。另外，酗酒也可以引起脂肪肝，

因为大量乙醇在肝脏脱氢可使比值升高，也减少脂肪酸的氧化，引起积累。

16．—个八肽的氨基酸组成：天冬氨酸（Asp ）、丝氨酸（Ser ）、甘氨酸（Gly ）、丙氨酸（Ala ）、苯丙氨酸（Phe ）、酿氨酸（Tyr ）和2个赖氨酸（Lys ）。用DNFB 处理后得

酶降解后，得组成分别为

水解该八肽，释放出游离的

DNFB 反应释放出

得到组成分别

为

Ser 及一个四肽和一个三肽，四肽的组成为说明肽序列为：用胰蛋白三肽与用胰蛋白酶消化后，的两个三肽及一个二肽。用胰凝乳蛋白酶根据以上结果，分析该八肽的序列并说明原因。 及的两个三肽及一个二肽。说明肽序列为：

【答案】用DNFB 与它反应，

水解后得到