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一、名词解释

1． 穿梭载体（shuttle vector）

【答案】穿梭载体是指具有多个复制子能在两个以上的不同宿主细胞复制和繁殖的载体。

2． 反式作用因子

【答案】反式作用因子是指通过直接结合或间接作用于DNA 、RNA 等核酸分子，对基因表达发挥不同调节作用 （激活或抑制：）的各类蛋内质因子的总称，也称反式作用元件。

3． DNA 解链温度（melting temperature, T m ）

【答案】DNA 解链温度是指DNA 变性过程中单链达到一半时的温度或DNA 变性过程中紫外吸收达到最大增值一半时的温度。

4． 转录单位（transcription unit）

【答案】转录单位是指从转录起始位点到转录终正位点所对应的、作为RNA 聚合酶模板的基因序列范围，可以是单一基因，也可以是多个基因。一个转录单位就是从启动子到终止子的一段序列，是一段以一条单链RNA 分子为表达产物的DNA 片段，这是转录单位的重要特征。

5． 同源重组（homologous recombination）

【答案】同源重组是指发生在DNA 的同源序列之间的重组，真核生物的非姐妹染色单体的交换，细菌的转化、转导和接合，噬菌体的重组等都属于这种类型。同源重组要求较大的DNA 片段进行交换它们的序列相同或接近相同。

6． 蛋白质印迹法（Western blotting）

【答案】蛋白质印迹法是指将经过凝胶电泳分离的蛋白质转移到膜（如硝酸纤维素膜、尼龙膜等）上，再对转移 膜上的蛋白质进行检测的技术。转移可用电泳法等，检测常用与特定蛋ft 结合的标记抗体或配体，由此可判断特 定蛋白质的存在与否和分子质量大小等。

7．

【答案】核开关。核开关是指一类通过结合小分子代谢物调控基因表达的mRNA 元件，它位于特定的mRNA 区域，可以不依赖于任何蛋白质因子而直接结合小分子代谢物，继而发生构象重排，影响mRNA 活性。

8． 移码突变（frameshi Kmutation）

【答案】移码突变是指由于单个碱基或者非三的整倍数的碱基的插入或缺失引起的从突变位

点开始整个可读框的改变，从而产生完全不同的一系列氨基酸的突变。

9． 聚合酶链式反应（polymerase chain reaction）

【答案】聚合酶链式反应，简写作PCR , 是指根据天然DNA 的复制机制在体外通过酶促反应有选择地大量扩增 （包括分离）一段目的基因的技术。利用两种寡核苷酸引物分别与特异性DNA 区段的正链和负链末端互补，经过模板DNA 变性，模板DN Α-引物的配对，在DNA 聚合酶作用下发生引物延伸反应，三个反应阶段后生成新的子代DNA 双链，经多次循环后得到大量目标DNA 片。

10．Telomerase

【答案】端粒酶。端粒酶是指由蛋白质和RNA 两部分组成的一种反转录酶，其中RNA 作为模板序列，指导合成染色体末端的端粒DNA 的重复序列片段。

二、填空题

11．常见的转录活化域的特征性结构包括：带负电荷的螺旋结构，富含_____的结构和富含_____的结构。

【答案】谷氨酰胺；脯氨酸

【解析】转录激活域是由30〜100个氨基酸残基组成的。根据氨基酸组成特点，转录激活域又有酸性激活域、 谷氨酰胺富含区域及脯氨酸富含区域。

12．在反密码子与密码子的相互作用中，反密码子IGA 可识别的密码子有_____，_____和_____。

【答案】UCC ; UCU; UCA

【解析】根据摆动假说，当反密码子的第一位是I 时，可识别3种密码子：

13．真核生物tRNA 的成熟过程中需要通过拼接去除内含子，这个过程需要a._____和b._____两种酶。

【答案】核酸内切酶; 连接酶

【解析】tRNA 前体的加工包括:

（1）在核酸内切酶RNaseP 作用下，从5' 末端切除多余的核苷酸;

（2）在核酸外切酶RNaseD 作用下，从3' 末端切除多余的核苷酸;

（3）由核苷酸转移酶催化，3' 末端加CC Α-OH ;

（4）核酸内切酶催化进行剪切反应，剪掉内含子，由连接酶连接外显子部分;

（5）化学修饰作用，如甲基化、脱氨基、还原反应等。

14．真核生物的DNA 含有许多重复序列，按其复性快慢可分为_____、_____和_____3类。

【答案】高度重复序列; 中度重复序列; 不重复序列

【解析】根据DNA 复性动力学研究，真核生物的DNA 序列可以分为3种类型:

（1）不重复序列:在一个基因组中一般只有一个或几个拷贝，占DNA 总量的40%~80%，在复性动力学中对应于慢复性组分;

14（2）中度重复序列:往往分散在不重复序列之间，重复次数为10~10，占DNA 总量的

10%~40%，在复性动力学中对应于中间复性组分;

（3）高度重复序列（卫星DNA ）:由6~100个碱基组成，在DNA 链上串联重复成干上万次，占基因组的10%~60%，在复性动力学中对应于快复性组分。

15．人线粒体基因组DNA 长度约为a._____kb，它所编码的基因按功能可分为b._____，e_____和d._____。

等三类。

【答案】17; rRNA基因；tRNA 基因；蛋白质基因

【解析】人线粒体基因组很小（16569bp ）, 仅能编码2种rRNA , 22种tRNA 和13种蛋白质。

16．真核生物mRNA 的转录后加工主要包括_____、_____、_____等方面。

【答案】5' 末端加帽; 3' 端加尾; 剪接作用

【解析】原核生物转录生成的初级转录产物mRNA 不需经过复杂的加工就表现有活性。唯一的加工作用是多顺反子mRNA 在RNaseIII 的催化下，裂解为单独的顺反子。而真核生物转录生成的mRNA 要经过较复杂的加工过程。包括:（1）5' 末端加帽; （2）3' 端加尾; （3）剪接去除内含子并连接外显子; （4）核苷酸编辑; （5）甲基化修饰等等。

三、简答题

17．DNA 复制时为什么前导链是连续复制，而后随链是以不连续的方式复制? 并请以大肠杆菌为例简述后随链复制的各个步骤。

【答案】（1）前导链是连续复制，而后随链是以不连续的方式复制的原因:

①DNA 的合成方向是5' →3' ，DNA 聚合酶只有5' →3' 聚合酶活性，而没有3' →5' 聚合酶活性。

②复制叉附近解开的DNA 链一条是5' →3' 方向，另一条是3' →5' 方向，两者分别是后随链和前导链的模板。

DNA 合成方向和复制叉移动方向相同，③在DNA 的一条模板链上，可以连续复制; 而在另一

条模板链上，DNA 合成方向和复制叉移动方向却是相反的。

（2）大肠杆菌DNA 复制包括复制的起始、DNA 片段的延长和复制的终止三个过程。具体如下:

①复制起始

a. 复制叉的形成

复制蛋白DnaA 识别大肠杆菌复制起始点（oriC ）并与其结合，然后DnaC 结合上去，允许解旋酶DnaB 结合，将母链DNA 分开，形成一个复制叉; 在起始点出现复制泡，从起点向两个方向移动。