题目：低剪切应力对人早孕绒毛膜滋养层细胞分裂及迁移的影响

在胎盘发育过程中，滋养层细胞群体先入侵子宫内膜，发生迁移并通过子宫内膜组织同子宫内膜的毛细血管接触，之后入侵进入子宫毛细血管发生迁移，最后定居在母体螺旋动脉血管管腔内并对子宫螺旋动脉血管进行重构。这提示我们，在体内，滋养层细胞是沿着与血流相反的方向移动并最终重构子宫螺旋动脉的。在这个过程中，滋养层细胞的粘附与侵入是至关重要的环节，尤其是滋养层细胞侵入子宫组织的精细调控非常关键，过度侵入或侵入不足均将导致病变。已有的体外研究发现，滋养层细胞可以对流动剪切做出反应。暴露在流动剪切力下后，细胞迁移的总体趋势是顺流动方向而下的，还发现剪切应力可使滋养层细胞保持高水平β1整合素表达。本论文基于已有的实验事实，从生物力学的角度，在低剪切应力(1~8dyn/cm2 )下，研究了流动剪切应力对滋养层细胞形态、分裂能力和迁移运动的影响。从而证明滋养层细胞逆流体迁移运动的出现，为更深入了解胚胎植入机制及妊娠滋养层相关疾病提供实验依据。主要的研究内容及结果如下：1、利用胰蛋白酶-胶原酶消化法，经淋巴细胞分层液纯化，联合反复差速贴壁法，免疫化学鉴定，证实获得了性状稳定的人早孕绒毛膜细胞滋养层细胞，可以满足力学加载实验。2、采用显微观察技术，研究了剪应力对滋养层细胞形态的影响，观察结果表明，滋养层细胞沿着流体流动方向形状改变，细胞拉长，相邻细胞之间的连接接触增多。3、通过实时录像技术，施加不同大小的低流动剪应力，研究了滋养层细胞在剪切应力作用下分裂能力的变化。滋养层细胞在低剪切应力作用下，细胞分裂率同静止状态相比差异不显著，胶原的存在可以一定程度的提高流动剪切下的滋养层细胞分裂率。4、通过实时录像技术，发现在剪切应力作用下，滋养层细胞总体的运动趋势是顺着流体流动的方向，但在低剪切应力下（1~8dyn/cm2）滋养层细胞出现逆流体迁移的现象，证明滋养层细胞可以对流动剪切应力做出响应，并且血管内微环境因素的参与可以加强对这种逆流迁移运动。5、采用酶消化-组织贴块联合培养法及免疫化学鉴定，获得了生长状况良好、纯度高的人脐静脉内皮细胞与平滑肌细胞，便于后续研究工作的开展。