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2018年北京中医药大学临床医学院(西苑医院)306西医综合[专业硕士]之生物化学考研基础五套测试题

  摘要

一、名词解释

1.

蛋白质的腐败作用

用。

2. 转座子(transposon )。

【答案】转座子是指可以在同一 DNA 分子的不同位置或者不同DNA 分子之间发生转移的DNA 序列。

3. 糖的有氧氧化(aerobic oxidation)。

【答案】糖的有氧氧化是指葡萄糖或糖原在有氧条件下氧化成水和二氧化碳的过程。是糖氧化的主要方式。

4. 小分子核内 RNA (small nuclear RNA, snRNA)。

【答案】小分子核内RNA 是指真核生物细胞核内一些序列高度保守的小分子RNA , 富含U ,与蛋白质构成复合 物snRNP , 参与mRNA 前体的拼接。

5.

【答案】(半胱谷氨酰胺)是由谷氨酸的Y-羧基与半胱氨酸的a-氨基缩合而成,这与蛋白质分子中的肽键不同。

6. DNA 二级结构。

【答案】DNA 的二级结构是指两条DNA 单链通过碱基互补配对的原则,所形成的双螺旋结构。

7.

乙醇发酵

8. 肽(peptide )。

【答案】肽是氨基酸的线性聚合物,常称肽链(peptidechain )。蛋白质是由一条或多条具有特定氨基酸序列的多肽链构成的大分子。

第 2 页,共 34 页 【答案】蛋白质的腐败作用是指肠道细菌对部分未消化的蛋白质及部分消化产物所发生的作 还原乙醛,得到乙醇的过程。 【答案】乙醇发酵是指在缺氧的条件下,

糖酵解产生的

二、问答题

9.

的固定不仅存在于植物光合作用合成葡萄糖的过程中,也存在于动物体内合成葡萄糖及固定的酶促反应方程式,并简要说明

固定及同化

固定及同化

在其合成脂肪的过程中。分别写出这些代谢途径中【答案】(1

(2

途径。

(3

)糖异生。(4)FA

从头合成。乙酰途径。

中所起的作用。(参与反应的物质只要写名称或代号,不要求写结构式).

10.如果用尿嘧啶-N-糖苷酶缺陷的大肠杆菌菌株(ung-)或dUTPase 缺陷的大肠杆菌菌株(dut-)重复冈 崎利用[H]-脱氧胸苷所做的脉冲标记和追踪实验,实验结果会有什么变化?请解释原因。

【答案】冈崎实验得到的DNA 标记片段不仅包括由于后随链不连续合成产生的冈崎片段,还包括由于dUTP 的参入而诱发细胞内的碱基切除修复系统切开DNA 链产生的DNA 片段。如果用

缺陷的大肠杆菌菌株重复同崎实验,则参入的U 不能被尿嘧啶-N-糖苷酶识别并切去尿嘧啶碱基,不会产生对内切核酸酶敏感的无碱基位点,因而实验只能得到由于后随链不连续合成产生的网崎片段,标记的DNA 片段数量减少。

如果用dUTPase

缺陷的大肠杆菌菌株重复冈崎实验,则细胞内的dUTP 不会被dUTPase 水解而含量増加,有更多的U 参入正在合成的DNA 中,因而实验中得到的由于dUTP 的参入而产生的DNA 片段将增加, 加上由于后随链不连续合成产生的冈崎片段,标记的DNA 片段数量将増加。

11.在大肠杆菌DNA 分子进行同源重组的时候,形成的异源双螺旋允许含有某些错配的碱基对。为什么这些错配的碱基对不会被细胞内的错配修复系统排除?

【答案】大肠杆菌在进行错配修复的时候,根据母链和新生链的甲基化程度不同而识别出新生链上错配的碱基,再将新生链上错误的碱基切除,而不会切掉母链上正确的碱基。在DNA 进行同源重组的时候,形成的异源双螺 旋尽管会含有某些错配的碱基对,但异源双螺旋的两条DNA 链上都是高度甲基化的,因此这些错配的碱基对不 会被细胞内的错配修复系统排除。

12.

何为还原糖?蔗糖是一种由葡萄糖和果糖组成的二糖虽然这两种单糖都是还原糖,但为什么蔗糖却不是?

【答案】

凡具有能被

别为和但

糖苷键相连,即两个异头碳均参与了糖苷氧化的游离羰基碳的糖都是还原糖。葡萄糖和果糖的羰基碳分3在形成蔗糖时这两个单糖残基通过

键的形成而不能再与氧化剂反应,因此蔗糖不是还原糖。

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13.结合肌红蛋白和血红蛋白的氧合曲线,简述动物体内的氧从肺中转运到肌肉中的过程。肺泡中的

【答案】

当的比血

红蛋白的(26 Toir )低得多,反映了肌红蛋白对氧的高亲和性。肌红蛋白和血红蛋白

下,如在肺部(大约100 为时,肌红蛋白处于半饱和状态,所以在同样的条件下,肌红蛋白是

肌红蛋白的肌肉的毛细管中血红蛋白在肺泡中的Y

值是是20T 〇rr ,

血红蛋白的

在肌肉毛细管中的Y

值是的生理作用直接与它们在低氧压下对氧的相对亲和性有关。

当在高

约50 Torr

以下的Toir )时,肌红蛋白和血红蛋白对氧的亲和性都很高,两者几乎都被饱和了。然而当处于低于大时,肌红蛋白对氧的亲和性明显要比血红蛋白对氧的亲和性高得多。在肌

低血红蛋白对氧的亲和性低,所以红细胞中血红肉等组织的毛细管内,

由于蛋白载有的很多氧被释放出来,释放出来的氧都可被肌肉中的肌红 蛋白结合。肌红蛋白和血红蛋白对氧亲和性的差异形成了一个有效地将氧从肺转运到肌肉的氧转运系统。

14.假定你决定从一种新的生物Streptococcus bartelium体内纯化核糖核酸酶,你选择盐析作为纯化的第一步,随着你JJnA 硫酸铵到细胞裂解物之中,进行分级分离。如果你添加的盐浓度是0.5mol/L、lmol/L、1.5mol/L、2mol/L、和2.5mol/L,你如何确定你要的蛋白质在哪一级分离沉淀之中?

如果你选择离子交换层析作为纯化核糖核酸酶的第二步,同样需要确定哪一部分含有目标蛋白。你会使用哪一种离子交换树脂? 为什么? 你如何从交换树脂中洗脱下你的目标蛋白?

你将纯化的蛋白质走SDS-PAGE ,在考马斯亮蓝染色以后,你看到一条单一的

种蛋白质是一种核糖体蛋白,于是你决定再进行一次蛋白质染色,这一次你发现了一条

小的条带。这一次染色方法是什么?为什么

会多显示出新的条带,你如何分离这两种蛋白质?

【答案】(1)在纯化蛋白质过程中,首先需要建立一种测定活性的方法。测定核糖核酸酶活性的方法是利用其将RNA 降解成单个核苷酸的活性。使用放射性标记的NTP ,可转录出带放射性标记的RNA 。以此作为核糖核酸酶的底物,将其与含有酶的部分保温,然后用TCA 沉淀,再使用特定的滤膜过滤,通过测定流过滤膜的带有同位素标记的核苷酸的放射性,可测定出纯化物中酶活性的高低。

(2)既然核糖核酸酶的底物是磷酸核糖骨架带负电荷的RNA , 核糖核酸酶本身很可能带正电荷。因此,可考虑阳离子交换树脂来纯化核糖核酸酶。在低盐浓度下上柱,以吸附核糖核酸酶,然后用高盐缓冲液洗脱出核糖核酸酶。

(3)考马斯亮蓝染色的灵敏度仅能检测出含有大约lOOng 的条带,而银染的灵敏度达10ng 。所以使用考马斯亮蓝染色看不到的条带有可能通过银染看到。

为了将

的核糖体蛋白与的核糖核酸酶分开,

可使用凝胶过滤层析。

第 4 页,共 34 页 大小的大条带。为了确定它是不是核糖核酸酶,你决定将条带切下,然后测序。然而,你吃惊的发现,这的