2017年东华大学化学化工与生物工程学院641分子生物学考研导师圈点必考题汇编
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一、名词解释
1． Blue-white screening
【答案】蓝白斑筛选。蓝白斑筛选是指基于半乳糖苷酶系统的一种重组子筛选方法。其基本原理是很多载体都
携带一段来自大肠杆菌的
序列的宿主细胞。宿主经上述质粒转化后，
整近操纵基因区段的质粒之间实现了互补
活性蛋白质。由
互补而产生的操纵子DNA 区段，
其中有半乳糖苷酶基因的调控序列和前146个氨基酸的编码信息，这种载体适用于可编码半乳糖苷酶C 端部分 基因在缺少近操纵基因区段的宿主细胞与带有完，产生完整 细菌在诱导剂的作用下，在生色底物存在时产生易于识别的蓝色菌落。而当外源DNA 插入到质粒的多克隆位点后，几乎不可避免地导致无互补能力的氨基端片段，使得带有重组质粒的细菌形成白色菌落。
2． TATA 框
【答案】TATA 框是指位于基因转录起始点上游-30p~-25bp（真核）或-10bp （原核）的一段保守性较高的序列，控制转录起始的准确性和频率，因共有序列为TATAAAA 而得名。
3． 拓扑异构酶（topoisomerase ）
【答案】拓扑异构酶是指能在闭环DNA 分子中改变两条链的环绕次数的酶，其作用机制是先切断DNA ，让DNA 绕过断裂点以后再封闭形成双螺旋或超螺旋DNA 。
4． 基因扩増
【答案】基因扩增是指某些基因的拷贝数专一性大量增加的现象，结果使得细胞在短期内产生大量的基因产物以满足生长发育的需要。
5． 聚合酶链式反应（polymerase chain reaction）
【答案】聚合酶链式反应，简写作PCR , 是指根据天然DNA 的复制机制在体外通过酶促反应有选择地大量扩增 （包括分离）一段目的基因的技术。利用两种寡核苷酸引物分别与特异性DNA 区段的正链和负链末端互补，经过模板DNA 变性，模板DN Α-引物的配对，在DNA 聚合酶作用下发生引物延伸反应，三个反应阶段后生成新的子代DNA 双链，经多次循环后得到大量目标DNA 片。
6． 反式作用因子
【答案】反式作用因子是指通过直接结合或间接作用于DNA 、RNA 等核酸分子，对基因表
达发挥不同调节作用 （激活或抑制：）的各类蛋内质因子的总称，也称反式作用元件。
7． 锌指结构（zine finger motif）
【答案】锌指结构是指许多转录因子共有的DNA 结合结构域，具有很强的保守性，具有此结构的蛋白借肽链的弯曲使两个Cys 和两个His 与一个锌离子，或四个Cys 与一个锌离子形成形似手指状的三级结构。
8． tmRNA
【答案】转移—信使RNA 。tmRNA 是指细菌体内一种修复翻译水平上受阻的遗传信息表达过程的反式翻译机制的核心分子，它兼具tRNA 和mRNA 的特点，在SmpB 蛋白的帮助下特异性识别携带mRNA 缺失体的核糖体，在核糖体蛋白S1的传递作用下结合在A 位点上，一方面延续被中断的mRNA 上的遗传信息，一方面终止蛋白质的合成，释放被束缚的核糖体和tRNA 进入新的翻译过程。
9． 断裂基因
【答案】断裂基因是指在真核生物结构基因中，编码某一个蛋白质不同区域的各个外显子并不连续排列在一起， 而常常被长度不等的内含子所隔离，形成镶嵌排列的断裂方式。所以，真核基因常被称为断裂基因。
10．SDS 电泳（SDS-PAGE ）
【答案】SDS 电泳（SDS-PAGE ）是指根据SDS 和还原试剂将蛋白质分子解聚后亚基的大小，在恒定pH （碱性） 缓冲系统中分离的方法，主要用于测定蛋白质亚基分子质量。
二、填空题
11．cccDNA 是指_____。
【答案】共价闭环DNA
【解析】cccDNA 是乙肝病毒前基因组RNA 复制的原始模板。
12．人线粒体基因组DNA 长度约为a._____kb，它所编码的基因按功能可分为b._____，e_____和d._____。
等三类。
【答案】17; rRNA基因；tRNA 基因；蛋白质基因
【解析】人线粒体基因组很小（16569bp ）, 仅能编码2种rRNA , 22种tRNA 和13种蛋白质。
13．原核生物DNA 聚合酶III 中β亚基二聚体的一个主要功能是_____。
【答案】提高酶的持续合成能力
【解析】大肠杆菌的DNA 聚合酶III 包含有10个亚基，生物活性为二聚体。其中β亚基的功
能犹如夹子，两个β亚基夹住模板与引物双链向前滑行，使聚合酶在完成复制前不再脱离DNA ，从而提高酶的持续合成能力。
14．在反密码子与密码子的相互作用中，反密码子IGA 可识别的密码子有_____，_____和_____。
【答案】UCC ; UCU; UCA
【解析】根据摆动假说，当反密码子的第一位是I 时，可识别3种密码子：
15．常见的转录活化域的特征性结构包括：带负电荷的螺旋结构，富含_____的结构和富含_____的结构。
【答案】谷氨酰胺；脯氨酸
【解析】转录激活域是由30〜100个氨基酸残基组成的。根据氨基酸组成特点，转录激活域又有酸性激活域、 谷氨酰胺富含区域及脯氨酸富含区域。
16．SDS-PAGE 中，凝胶的单体为_____，_____是交联剂。蛋白质结合SDS 后均带_____电荷，肽链越长迁移速度越_____。
【答案】丙烯酰胺；甲叉双丙烯酰胺；负；慢
三、简答题
17．RNA 的结构有哪些特点?
【答案】（1）RNA 含有核糖和嗜咤，与DNA 不同，一般为单链长分子;
（2）RNA 不是双螺旋结构，但可通过自身链的折叠，在局部形成双螺旋结构;
（3）RNA 中Α-U , G-C 配对，未配对的区域可形成突起，也可自由旋转，并由于RNA 碱基和核糖磷酸骨架之间的相互作用，可折叠成复杂的三级结构。
18．简述σ因子的作用。
【答案】σ因子作为所有RNA 聚合酶的辅助因子起作用，主要负责模板链的选择和转录的起始，它是酶的别构效应物，使酶专一性识别模板链上的启动子，可以极大地提高RNA 聚合酶对启
动子区DNA 序列的亲和力，还能极大地降低RNA 聚合酶与模板DNA 上非特异性位点的亲和力。
19．简述RNA 转录的概念及其基本过程。
【答案】转录是指以DNA 的一条链为模板，在RNA 聚合酶的作用下，依据碱基配对原则，合成一条与DNA 模板链的一定区段互补的RNA 链的过程，即遗传信息、由DNA 流向RNA 的过程。
无论是原核细胞还是真核细胞，转录的基本过程都包括以下几个步骤:
（1）模板识别
模板识别是指RNA 聚合酶与启动子DNA 双链相互作用并与之相结合的过程。
（2）转录起始
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