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2017年华北理工大学生命科学学院904分子生物学考研仿真模拟题

  摘要

一、名词解释

1. 阻遏蛋白

【答案】阻遏蛋白是指一类在转录水平对基因表达产生负控作用的蛋白质,在一定条件下与DNA 结合,一般具有诱导和阻遏两种类型。

2. 分子伴侣(molecular chaperone)

【答案】分子伴侣是指一类序列上没有相关性但有共同功能的保守性蛋白质,它们在细胞内能帮助其他多肽进行正确的折叠、组装、运转和降解,如热休克蛋白。

3. 编码链(coding strand)

【答案】编码链是指DNA 双链中含编码蛋白质序列的那条链,与模板链互补,也称有义链(sensestrand )或正链。其序列与信使核糖核酸相同,只是信使核糖核酸中的U (尿嘧啶)组成与编码链中的T (胸腺嘧啶)组成相区别。

4. TATA 框

【答案】TA TA 框是指位于基因转录起始点上游-30p~-25bp(真核)或-10bp (原核)的一段保守性较高的序列,控制转录起始的准确性和频率,因共有序列为TATAAAA 而得名。

5. polysome

【答案】多核糖体。多核糖体是指蛋白质合成过程中结合在同一条mRNA 上的多个核糖体,能同时合成若干条蛋白质多肽链。

6. 单顺反子mRNA (monocistronic mRNA)和多顺反子mRNA (polycistronic mRNA)。

【答案】单顺反子mRNA 是指能翻译成一条肤链的信使核糖核酸(mRNA )来自单顺反子;

,多顺反多顺反子mRNA 是指两个以上相关基因串在一起转录所得到的信使核糖核酸(mRNA )

子mRNA 一般可同步翻译产生功能相关的多个蛋白质或酶。

7. 转录单位(transcription unit)

【答案】转录单位是指从转录起始位点到转录终正位点所对应的、作为RNA 聚合酶模板的基因序列范围,可以是单一基因,也可以是多个基因。一个转录单位就是从启动子到终止子的一段序列,是一段以一条单链RNA 分子为表达产物的DNA 片段,这是转录单位的重要特征。

8. 蛋白质印迹法(Western blotting)

【答案】蛋白质印迹法是指将经过凝胶电泳分离的蛋白质转移到膜(如硝酸纤维素膜、尼龙

膜等)上,再对转移 膜上的蛋白质进行检测的技术。转移可用电泳法等,检测常用与特定蛋ft 结合的标记抗体或配体,由此可判断特 定蛋白质的存在与否和分子质量大小等。

二、简答题

9. 什么是RNA editing?简述其机制及意义。

【答案】(1)RNA 的编辑是指某些RNA ,特别是mRNA 的一种加工方式,编辑的结果导致DNA 所编码的遗传信息的改变。

(2)介导RNA 编辑的机制

①位点特异性脱氨基作用:载脂蛋白mRNA 中U →A ,谷氨酸受体蛋自mRNA 中A →I 都属于脱氨基作用的结果。分别由胞m 嘧啶和腺嘌呤脱氨酶所催化。

②尿嘧啶插入或删除:由于指导RNA 上存在一些未能配对的腺嘌呤,形成缺口,为插入尿嘧

啶提供了模板,反应完成后,指导RNA 从mRNA 上解离下来,而mRNA 则被用做翻译的模板。

(3)RNA 编辑的生物学意义

①校正作用:有些基囚在突变过程中丢失的遗传信息可能通过RNA 编辑得以修复;

②调控翻译:通过编辑可以构建或去除起始密码子和终庄密码子,是基因表达调控的一种方式;

③扩充遗传信息:能够使基因产物获得新的结构和功能,有利于生物的进化。

10.基因、外显子和开放阅读框的区别。

【答案】(1)基因是产生一条多肤链或功能RNA 分子所必需的全部核苷酸序列。

(2)外显子是基因及其转录初级产物上可表达的序列,或转录初级产物上通过拼接作用而保留于成熟的RNA 中的核苷酸序列或基因中与成熟RNA 相对应的DNA 序列。

(3)开放阅读框是基因序列的一部分,包含一段可以编码蛋白的碱基序列,不能被终止子打断,也就是被翻译的区域。

11.简述P53基因“基因卫士”的功能。

【答案】p53基因是位于17号染色体,编码53kDa 的多肽,活性形式为同源四聚体。人类肿瘤中50%〜60%发 现有该基因的突变,一般是一对等位基因中的一个发生错义突变,造成蛋白质中单个氨基酸残基的替换。突变后的p53蛋白不仅自身失去功能,而且还能与野生型等位基因的产物正常的P53蛋白聚合成无功能的四聚体。p53蛋白是在各种组织中普遍存在的转录因子,当DNA 受到损伤时,引起p53蛋白半衰期延长和p53蛋內 活化,p53蛋白水平升高。P53蛋白活化后,可以激活靶基因的转录,其中一个重要的靶基因是期细胞周期抑制物p21,另一个是DNA 修复蛋白,因而使DNA 受损的细胞不再分裂,修复损伤而维持基因组的稳定。p53的另一个功能是促进细胞凋亡。所以该蛋白通过阻止DNA 受损细胞进入细胞周期,完成修复以及促进凋亡两条途径,使细胞周期停滞,起稳定基因组和抑制突变细胞产生的作用,从而抑制肿瘤发生。

12.说出免疫共沉淀实验的原理与过程,比较酵母双杂交技术和免疫共沉淀技术在研究蛋

白质相互作用方面的优缺点。 【答案】(1)免疫共沉淀

①优点

a. 参与相互作用蛋白是天然状态;

b. 蛋白的相互作用是在自然状态下进行的;

c. 分离得到的蛋白复合物是天然状态的。

②缺点

a. 灵敏度不高,检测不到低亲和力和瞬时的蛋白质-蛋白质相互作用;

b. 相互作用的蛋白质需要第三者来连接;

c. 方法存在冒险性,必须根据实验预测结果选择检测抗体,若预测不正确,实验就得不到结果。

(2)酵母双杂交系统

①优点

a. 不用纯化蛋白质等繁琐步骤;

b. 结果真实性高,其在活细胞中进行;

c. 检测灵敏度高,可检测存在于蛋白质之间的微弱的和瞬时作用;

d. 可分析不同部位、不同细胞蛋白,可采用不同组织、器官、细胞类型和分化时期材料构建cDNA 文库来进行分析。

②缺点

a. 其蛋白间的相互作用定位于细胞核内,而许多蛋白间的相互作用依赖于翻译后加工如糖基化、二硫键形成等不能在核内无法进行;

b. 某些辅助蛋白限制了某些细胞外蛋白和细胞膜受体蛋白等的研究;

c. 存在着“假阳性”。

13.真核生物的原始转录产物必须经过哪些加工才能成为成熟mRNA ,以用做蛋白质合成的模板?

【答案】真核生物的原始转录产物RNA 转录后的加工有三种形式:

(1)5' 端加帽

转录产物的5' 端通常要装上甲基化的帽子; 有的转录产物5' 端有多余的顺序,则需切除后再装上帽子。

(2)3' 端加多聚A 尾巴

转录产物的3' 端通常由多聚A 聚合酶催化加上一段多聚A ; 有的转录产物的3' 端有多余顺序,则需切除后再加上尾巴。装5' 端帽子和3' 端尾巴均可能在剪接之前就已完成。

(3)修饰

对某些碱基进行甲基化等。

(4)剪接