2017年武汉大学化学与分子科学学院885分子生物学考研仿真模拟题
● 摘要
一、名词解释
1． polysome
【答案】多核糖体。多核糖体是指蛋白质合成过程中结合在同一条mRNA 上的多个核糖体，能同时合成若干条蛋白质多肽链。
2． YAC
【答案】酵母人工染色体。酵母人工染色体是指一种能够克隆长达400Kb 的DNA 片段的载体，含有酵母细胞中 必需的端粒、着丝点和复制起始序列，可用于基因组大片段库构建。
3． Gene Family
【答案】基因家族。基因家族是指一组功能相似且核苷酸序列具有同源性的基因，可能由某一共同祖先基因（ancestral gene ）经重复和突变产生。基因家族的成员可以串联排列
，如rRNA 、tRNA 在一起，形成基因族（gene cluster）或串联重复基因（tandemly repeated genes）
和组蛋白的基因；有些基因家族的成员也可位于不 同的染色体上，如珠蛋白基因；有些成员不产生功能产物，这种基因称为假基因（Pseudogene ）。
4． 等电聚焦
【答案】
等电聚焦是指利用蛋白质分子或其他两性分子的等电点的不同，在一个稳定的、连续的、线性pH 梯度中进行蛋白质的分离和分析的技术。
5． 蛋白质印迹法（Western blotting）
【答案】蛋白质印迹法是指将经过凝胶电泳分离的蛋白质转移到膜（如硝酸纤维素膜、尼龙膜等）上，再对转移 膜上的蛋白质进行检测的技术。转移可用电泳法等，检测常用与特定蛋ft 结合的标记抗体或配体，由此可判断特 定蛋白质的存在与否和分子质量大小等。
6． 重组修复
【答案】重组修复是指遗传信息有缺损的子代DNA 分子从同源DNA 的母链上将相应的核苷酸序列移至缺口处，再合成新的序列来填补母链的空缺的修复过程，因为发生在DNA 复制之后，又称复制后修复。
7． 穿梭载体（shuttle vector）
【答案】穿梭载体是指具有多个复制子能在两个以上的不同宿主细胞复制和繁殖的载体。
8． DNA 复性（DNA renaturation）
【答案】DNA 复性是指DNA 双螺旋变性后的两条互补单链重新恢复成双螺旋结构的过程。
二、简答题
9． 1952年Hershey 和Chase 通过噬菌体感染实验证实遗传物质是DNA 而不是蛋白质。简述此实验的内容。
3532【答案】首先用放射性同位素S 标记了一部分噬菌体的蛋白质，并用放射性同位素P 标记
了另一部分噬菌体的DNA , 因为硫只存在于T 2噬菌体的蛋白质，99%的磷存在于DNA 。然后，用被标记的T 2噬菌体分别去侵染细菌，当噬菌体在细菌体内大量增殖时，对被标记物质进行测试（检测放射性）。
测试的结果表明，噬菌体的蛋白质没有进入细菌内部，而是留在细菌的外部，噬菌体的DNA 进入了细菌体内，可见，噬菌体在细菌内的增殖是在噬菌体DNA 的作用下完成的。
10．简述原核生物与真核生物mRNA 的主要差别。
【答案】（1）真核生物5’一端有帽子结构，大部分成熟的mRNA 还同时具有3’一多聚A 尾巴，原核一般没有;
（2）原核的mRNA 可以编码几个多肤，真核只能编码一个，原核生物以多顺反子的形式存在，真核以单顺反子形式存在;
（3）原核生物以AUG 作为起始密码，有时以GUG ，UUG 作为起始密码，真核几乎永远以AUG 作为起始密码;
（4）原核生物mRNA 半衰期短，真核生物的mRNA 半衰期长。
11．RNA 的结构有哪些特点?
【答案】（1）RNA 含有核糖和嗜咤，与DNA 不同，一般为单链长分子;
（2）RNA 不是双螺旋结构，但可通过自身链的折叠，在局部形成双螺旋结构;
（3）RNA 中Α-U , G-C 配对，未配对的区域可形成突起，也可自由旋转，并由于RNA 碱基和核糖磷酸骨架之间的相互作用，可折叠成复杂的三级结构。
12．什么是完全基因敲除和条件基因敲除？
【答案】（1）完全基因敲除
完全基因敲除是指通过同源重组法完全消除细胞或者动物个体中的靶基因活性；
（2）条件基因敲除
条件基因敲除是指通过定位重组系统实现特定时间和空间的基因敲除。
13．DNA 以何种方式进行复制? 如何保证DNA 复制的准确性?
【答案】（1）双链DNA 的复制大都以半保留方式进行的，即双螺旋的DNA 分子解螺旋后，分别作为模板，按照碱基互补配对原则，在DNA 聚合酶的作用下合成新的互补链，形成了两个
DNA 分子的DNA 复制方式。通过θ型、滚环型或D 环型等以复制叉的形式进行。
①线性DNA 双链的进行双向复制
线性DNA 在复制中，当RNA 引物被切除后，留下5' 端的部分单链DNA 不能为DNA 聚合酶所作用，使子链短于母链，因此，线性DNA 复制子末端的复制需要有下列特殊的机制:
a. 将线性复制子转变为环状或多聚分子。
b. 在DNA 末端形成发夹式结构，使该分子没有游离的末端。
c. 在某种蛋白质（如末端蛋白）的介入下，在真正的末端上启动复制。
②环状双链DNA 的复制
可分为θ型、滚环型和D 环型几种类型。
a. θ型
复制的起始点涉及DNA 双链的解旋和松开，形成两个方向相反的复制叉。从一个起点开始，同时向两个方向进行复制，当两个复制方向相遇时，复制就停止。
b. 滚环型
DNA 的合成由对正链原点的专一切割开始，是单向复制的一种特殊方式，在噬菌体中很常见。
所形成的自由5' 端被从双链环中置换出来并为单链DNA 结合蛋白所覆盖，使其3'-OH 端在DNA 聚合酶的作用下不断延伸。在这个过程中，单链尾巴的延伸与双链DNA 的绕轴旋转同步进行。
c.D —环型
单向复制的一种特殊方式，叶绿体和线粒体DNA 、采用这样的机制。双链环在固定点解开进行复制，但两条链的合成是高度不对称的，最初仅以一条母链作为新链合成的模板，迅速合成出互补链，另一条链则成为游离的单链环（即D 环）。
（2）维持DNA 复制准确性的因素:
①内因
a. 按碱基配对原则进行DNA 链的合成。
b.DNA 聚合酶对碱基的识别作用，有利于选择正确的碱基掺入引物末端。
c.DNA 聚合酶对底物的识别作用，可以先识别引物最后一个碱基是否正确，后识别掺入的dNTP 是否正确。
d.DNA 聚合酶具有3' →5' 外切酶的作用，可以校正阅读。
e.RNA 引物最终被切除，提高了复制准确性。
f. 复制完成后对错配碱基进行修复的酶系统。
②外因
a. 浓度对核苷酸还原酶活性的调控，确保细胞内四种dNTP 在浓度上的平衡;
b.Mn 2+和Mg 2+的比例等。
14．简述人类基因组计划的科学意义。
【答案】人类基因组计划于20世纪90年代启动，计划测定人类单倍体染色体组中约30亿碱基对序列，解析人类基因组中携带的有关人类个体生长发育、生老病死的全部遗传信息。具有重
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