2017年河南科技大学农学院975分子生物学考研导师圈点必考题汇编
● 摘要
一、名词解释
1. Blue-white screening
【答案】蓝白斑筛选。蓝白斑筛选是指基于半乳糖苷酶系统的一种重组子筛选方法。其基本原理是很多载体都
携带一段来自大肠杆菌的
序列的宿主细胞。宿主经上述质粒转化后,
整近操纵基因区段的质粒之间实现了互补
活性蛋白质。由
互补而产生的操纵子DNA 区段,
其中有半乳糖苷酶基因的调控序列和前146个氨基酸的编码信息,这种载体适用于可编码半乳糖苷酶C 端部分 基因在缺少近操纵基因区段的宿主细胞与带有完,产生完整 细菌在诱导剂的作用下,在生色底物存在时产生易于识别的蓝色菌落。而当外源DNA 插入到质粒的多克隆位点后,几乎不可避免地导致无互补能力的氨基端片段,使得带有重组质粒的细菌形成白色菌落。
2. DNA 解链温度(melting temperature, T m )
【答案】DNA 解链温度是指DNA 变性过程中单链达到一半时的温度或DNA 变性过程中紫外吸收达到最大增值一半时的温度。
3. 蛋白质印迹法(Western blotting)
【答案】蛋白质印迹法是指将经过凝胶电泳分离的蛋白质转移到膜(如硝酸纤维素膜、尼龙膜等)上,再对转移 膜上的蛋白质进行检测的技术。转移可用电泳法等,检测常用与特定蛋ft 结合的标记抗体或配体,由此可判断特 定蛋白质的存在与否和分子质量大小等。
4. Telomerase
【答案】端粒酶。端粒酶是指由蛋白质和RNA 两部分组成的一种反转录酶,其中RNA 作为模板序列,指导合成染色体末端的端粒DNA 的重复序列片段。
5. 转录后加工(post-transcription processing)
【答案】转录后加工是指新合成的较大的前体RNA 分子,经过进一步的加工修饰,转变为具有生物学活性的、成熟的RNA 分子的过程,主要包括剪接、剪切和化学修饰。
6. YAC
【答案】酵母人工染色体。酵母人工染色体是指一种能够克隆长达400Kb 的DNA 片段的载体,含有酵母细胞中 必需的端粒、着丝点和复制起始序列,可用于基因组大片段库构建。
7. 无义突变(nonsensemutation )
【答案】无义突变是指在DNA 序列中任何导致氨基酸的三联体密码子转变为终止密码子
(UAG 、UGA 、U 从)的突变,它使蛋白质合成提前终止,合成无功能的或无意义的多肽。
8. 单顺反子mRNA (monocistronic mRNA)和多顺反子mRNA (polycistronic mRNA)。
【答案】单顺反子mRNA 是指能翻译成一条肤链的信使核糖核酸(mRNA )来自单顺反子;
,多顺反多顺反子mRNA 是指两个以上相关基因串在一起转录所得到的信使核糖核酸(mRNA )
子mRNA 一般可同步翻译产生功能相关的多个蛋白质或酶。
9. 重组修复
【答案】重组修复是指遗传信息有缺损的子代DNA 分子从同源DNA 的母链上将相应的核苷酸序列移至缺口处,再合成新的序列来填补母链的空缺的修复过程,因为发生在DNA 复制之后,又称复制后修复。
10.基因超家族
【答案】基因超家族是指一组由于序列的同源性通过序列比对可以彼此匹配而相关的基因。判定同源的主要标准是核苷酸残基的保守性,并参考功能的相似性。
二、填空题
11.DNA 物理图谱是DNA 分子的_____片段的排列顺序。
【答案】限制性内切酶酶解
,以【解析】物理图是指以已知核苷酸序列的DNA 片段(序列标签位点,STS )为“路标”
碱基对作为基 本测量单位(图距)的基因组图。物理图的主要内容是建立相互重叠连接的酶切
,并用PCR 方法予以证实。 “DNA 片段群”
12.第一个被解析出晶体结构的蛋白是_____。
【答案】胰岛素
13.原核生物DNA 聚合酶III 中β亚基二聚体的一个主要功能是_____。
【答案】提高酶的持续合成能力
【解析】大肠杆菌的DNA 聚合酶III 包含有10个亚基,生物活性为二聚体。其中β亚基的功能犹如夹子,两个β亚基夹住模板与引物双链向前滑行,使聚合酶在完成复制前不再脱离DNA ,从而提高酶的持续合成能力。
14.许多氨基酸都有多个密码子,除了_____只有一个密码子外,其余都有一个以上密码子。
【答案】色氨酸和甲硫氨酸
【解析】根据三个核苷酸组成一个密码子的原则,4种核苷酸可以组成64个密码子,其中UAA 、UAG 、UGA 为终止密码子,剩余61个代表20种氨基酸,除了色氨酸(UGG )和甲硫氨酸(Met )只有一个密码子以外,其余都有一个以上密码子。
15.氨酰tRNA 合成酶既能识别tRNA ,也能识别相应的_____。
【答案】氨基酸
16.表皮生长因子受体具有_____酶的活性。
【答案】酪氨酸激酶
【解析】表皮生长因子受体(EGFR )是一个170kDa 的跨膜糖蛋白受体,本身具有酪氨酸激酶活性,由表 皮生长因子激活,影响细胞的生长和分化。
酸激酶活力。EGFR 羧基末端的酪氨酸残基和对EGFR 的结合激活酪氨是EGF 结合后发生自动磷
对酸化的主要位点,一旦被激活,EGFR 的1068位和1173位磷酸化的酪氨酸残基就能介导
EGFR 的结合。此外,1173位磷酸化的酪氨酸残基是SHC 在EGFR 上的主要结合位点。EGFR 广泛分布在许多正常和恶性上皮细胞中,其过度表达和自我激活可能与 许多肿瘤的发生发展有关。目前主要用于各种上皮源性恶性肿瘤--头颈部鳞癌、肺癌、乳腺癌和膀胱癌等的研究。
17.真核生物RNA 聚合酶I 、II 和III 分别负责_____和_____基因的转录。
【答案】rRNA ; hnRNA ; tRNA
【解析】真核生物中存在3类RNA 聚合酶,其催化的转录产物及对α-鹅膏覃碱的敏感性见表。
表 真核生物的RNA 聚合酶
18.含HTH 的DNA 结合蛋白多以_____结构插入DNA 双螺旋的_____以识别DNA 的特定序列。
【答案】a 螺旋;大沟
,近羧【解析】这一类蛋白质分子中有至少两个螺旋,中间由短侧链氨基酸残基形成“转折”
基端的
螺旋中氨基酸残基的替换会影响该蛋白质在DNA 双螺旋大沟中的结合。与DNA 相
互作用时,同源域蛋白的第 一、二两个螺旋往往靠在外侧,其第三个螺旋则与DNA 大沟相结合。
三、判断题
19.细菌细胞用一种RNA 聚合酶转录所有的RNA ,而真核细胞则有三种不同的RNA 聚合酶。( )
【答案】错
【解析】在细菌中,一种RNA 聚合酶几乎负责所有的mRNA , rRNA 和tRNA 的合成; 真核生物中除了主要的RNA 聚合酶I 、II 、III ,还有线粒体和叶绿体RNA 聚合酶等。