2018年武汉大学医学研究院673生物化学与分子生物学之生物化学考研核心题库
● 摘要
一、名词解释
1. 异促效应。
【答案】异促效应是指非底物分子的调节物对别构酶的调节作用。
2. A 位点(aminoacylsite ,acceptor site)和 P 位点(peptidyl site)。
【答案】A 位点即氨酰基位点,是新掺入的氨酰
是延伸中的肽酰的结合位点。
3. RNA interference (RNA 干扰)。
【答案】RNAinterferenceCRNA 干扰)即RNAi ,是指与靶基因同源的双链RNA 诱导的特异性转录后基因表达 沉默的现象,其作用机制是双链RNA 降解产生的小干扰RNA (siRNA )与同源的靶mRNA 互补结合,导致mRNA 降解而抑制基因表达。RNAi 技术广泛用于基因功能研宄和重大疾病的基因治疗。
4. G 蛋白(Gprotein )。
【答案】G 蛋白(Gprotein )是一种界面蛋白,位于细胞膜的内侧,并由3个亚基组成鸟苷酸结合蛋白。当该三聚体与GTP 结合后,亚基被释放。亚基组成二聚体可以分别激活下游信息通路上的靶蛋白。
5. 液态镶嵌模型(fluid mosaic model)。
【答案】液镶嵌模型是指一种生物膜结构的模型。它认为生物膜是磷脂以疏水作用形成的双分子层为骨架,磷脂分子是流动性的,可以发生侧移、翻转等。蛋白质分子镶嵌于双分子层的骨架中,可能全部埋藏或者部分埋藏,埋藏的部分是疏水的,同样,,蛋白质分子也可以在膜上自由移动。因此称为流动镶嵌模型。
6. 发卡结构。
【答案】发卡结构是指单链RNA 分子在分子内部形成部分双螺旋的结构,这种部分双螺旋的结构类似于发卡。
7. DNA 二级结构。
【答案】DNA 的二级结构是指两条DNA 单链通过碱基互补配对的原则,所形成的双螺旋结
第 2 页,共 32 页 的结合位点;P 位点即肽酰基位点,或抑制
构。
8. 同义密码子。
【答案】同义密码子是指编码同一种氨基酸的密码子。
二、问答题
9. 请解释脂肪肝产生的原因?
【答案】脂肪肝是过多的甘油三酯在肝组织积存。正常情况下,甘油三酯与磷脂、载脂蛋白等结合成VLDL 分泌入血,如果磷脂合成原料缺乏,如必需脂肪酸、胆碱缺乏,甲基化作用障碍,甘油三酯不能形成VLDL 释出肝细胞,在肝细胞内积存而形成脂肪肝。另外,酗酒也可以引起脂肪肝,因为大量乙醇在肝脏脱氢可使比值升高,也减少脂肪酸的氧化,引起积累。
10.组成蛋白质的二十种氨基酸在化学结构上有何特点?它们在代谢中是合成哪些活性物质的重要原料?
【答案】20种氨基酸在化学结构上主要有三个特点:
(1)基总是结合在与COOH 基相连的原子碳原子上,所以称为. 氨基酸。
(2)除甘氨酸外的氨基酸都含不对称碳原子,所以它们都具有旋光性。
(3)组成蛋白质的氨基酸都是L-型氨基酸。氨基酸是合成蛋白质、酶、蛋白激素、核酸的重要原料。
11.当一种四肽与FDNB 反应后,用水解得及三种其他氨基酸。当这种四肽还原后再进行水解,水解液中发现有氨用胰蛋白酶水解时形成二种碎片。其中一种碎片用
酸,它们的排列顺序怎样? 基乙醇和一种与重氮苯磺酸反应生成棕红色的氨基酸。试问在原来的四肽中可能存在哪几种氨基
【答案】(1)因为四肽与FDNB 反应后,用6mol/LHCl水解得
(2)用 所以此肽N 端为Val 。还原后再水解,水解液中有氨基乙醇,说明此肽的C 端为Gly 。
(3)水解液中有一种与重氮苯磺酸反应生成棕红色的氨基酸,说明此氨基酸为His 或Tyr 。 (4)根据胰蛋白酶的专一性以及(1)、(2)、(3)可知四肽的顺序为:
12.什么是变偶假说?
【答案】变偶假说又称摆动假说。Crick 认为tRNA 上的反密码子的第一个碱基和mRNA 上密码子的第三个碱基的配对要求不很严格(即摆动性,wobble )。在tRNA 的反密码子中,除A 、G 、C 、U 4种碱基外,还经常出现次黄嘌呤(I )。I 的特点是它与U 、A 、C 三者之间都可形成配对。此外,tRNA 反密码子上的G 、U 可分别与密 码子上的U 、C 和G 、A 配对。
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13.RNA 聚合酶对NTP 的
义。 值在起始阶段高于在延伸阶段。你认为这对基因表达的调节有何意
值在起始阶段高于在延伸阶段意味着RNA 聚合酶在延伸【答案】RNA 聚合酶对NTP 的
阶段对NTP 的亲和 力高于起始阶段RNA 聚合酶对NTP 的亲和力,在NTP 的浓度较低的情况下,不多的NTP 优先与催化延伸反应 的RNA 聚合酶结合,这显然可以保证已进入延伸阶段的转录反应能够最终完成,这时新的基因转录的起始受到 限制。
14.如果mRNA 上的阅读框已被确定,它将只编码一种多肽的氨基酸顺序。从一种蛋白质的已知氨基酸顺序,是否能确定唯一的一种mRNA 的核苷酸序列? 为什么?
【答案】由于1个密码子只能编码一种氨基酸,在mRNA 的开放阅读框确定后,用遗传密码可以推出其相应蛋 白质的氨基酸序列。由于mRNA 是由DNA 转录而来的,如果基因(DNA )编码区的序列已知,也可由此推出相应表达产物的氨基酸序列。但是,由于除甲硫氨酸和色氨酸外的18种氨基酸均有一种以上的密码子,由蛋白质的氨基酸序列推断相应mRNA 的核苷酸序列时,我们会面1临多种选择。比如,由7个氨基酸的序列推测其 可能的mRNA 编码区序列,若其中有5个氨基酸有2个密码子,则能够与其相对应的核苷酸序列会有25种,即有32种。
15.外源基因导入动物细胞有哪些常用方法?
【答案】常用的方法有:(1)磷酸钙共沉淀法,用沉淀磷酸离子和DNA , 沉积在细胞质膜上的DNA 被细胞吸收,可能是通过吞嗤作用;(2) DEAD 葡聚糖(DE-AE-dextron )或聚阳离子(polycation )法,它能结合DNA 并促使细胞吸收;(3)脂质体(liposome )法,利用类脂经超声波、机械搅拌等处理,形成双脂层小囊泡, 将DNA 溶液包裹在内,它通过与细胞质膜融合而使DNA 进入细胞;(4)脂质转染法,用人工合成的阳离子类 脂与DNA 形成复合性,借助类脂穿过质膜而将DNA 导入细胞内;(5)电穿孔法,在脉冲高压电场作用下质膜 瞬间被击穿,DNA 得以进入细胞,细胞膜随即修复正常;(6)显微注射法,对哺乳动物受精卵等较大的细胞,导入外源DNA 可以用显微注射法,即在显微镜下,用极细的玻璃注射器针头
枪射击动物的表皮、肌肉和 乳房等获得成功的例子也有报道。
在以上诸方法中,磷酸钙共沉淀法成本低、操作方便,但效率低;脂质转染法和电穿孑1法,前者需要昂贵的试剂,后者需要特殊的仪器,但效率高,现在较常用。显微注射法效率极高,还可直接将DNA 送入核内,但 需要昂贵仪器,且技术复杂不易掌握。
16.原核生物和真核生物识别起始密码子的机制有什么不同?
【答案】原核生物和真核生物识别起始密码子的机制的不同点如下:
(1)原核生物依靠端的SD 序列与核糖体小亚基中端的反SD 序列之间
瑞的帽子结构,然后沿的相互作用,识别SD 序列下游的AUG 作为起始密码子。 (2)真核生物依靠帽子结合蛋白复合物和核糖体小亚基识别
第 4 页,共 32 页 插入细胞内并注入DNA 溶液;(7)基因枪(genegun )法,在动物转基因中使用相对较少,用基因
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