题目：核桃油中多不饱和脂肪的分离、纯化及降血脂功能研究

核桃在我国种植面积广泛，产量高。核桃仁中脂肪含量高达60%-70%，核桃油中含有90%以上不饱和脂肪酸，其中人体必需多不饱和脂肪酸亚油酸与亚麻酸含量较高，对于防治心脑血管疾病、降低动脉粥样硬化发病率及控制体内血糖指数均有显著作用。法国、日本等国家已将核桃油作为功能性保健食品，近几年我国核桃产业被高度重视。目前核桃加工主要集中在总油脂的榨取和核桃仁加工小食品方面，对于从核桃油中分离纯化多不饱和脂肪酸的研究较少，使核桃的保健功能没有得到充分发挥。本研究从核桃仁冷榨油入手，探究影响核桃油中亚油酸与亚麻酸分离纯化的因素，确定最佳生产工艺，评价保健，旨在为发展核桃保健油高端产品提供技术参考。经过试验研究，得出如下结论： 1. 核桃仁冷榨出油率为54.6%。 2. 经GC分析，得出冷榨核桃油中脂肪酸组成为：8.1%棕榈酸，2.9%硬脂酸，28.1%油酸，52.1%亚油酸，8.7%亚麻酸。 3. 在以单一因素试验为基础的前提下，使用响应面法，针对尿素包合法富集多不饱和脂肪酸相关工艺参数进行优化，确定各因素对脂肪酸纯度影响主次顺序依次为m1（混合脂肪酸）:m2（尿素）>V（95%乙醇）:m1（尿素）>包合时间>包合温度。经回归分析优化后，得到最佳工艺条件是：包合时间24 h，包合温度-10℃，m1（混合脂肪酸）:m2（尿素）比值为0.3，V（95%乙醇）:m2（尿素）比值为4。经一次尿素包合后亚油酸纯度可由最初的52.1%提高到80.20%，亚麻酸纯度由最初的8.7%提高至19.5%。 4. 在尿素包合法富集核桃油中多不饱和脂肪酸基础上，使用硝酸银-硅胶柱层析法分离核桃油中亚油酸和亚麻酸，最终确定最佳工艺条件为：20g硅胶与2gAgNO3配制成硝酸银硅胶柱，向硅胶柱中加入与吸附剂比例为1:15的脂肪酸， 0.6mL/min洗脱剂流速，在洗脱完毕后洗脱液中亚油酸的含量升高至99.5%，亚麻酸的含量由尿素包合后的19.5%升高至95.8%，与最初冷榨核桃油相比，亚麻酸纯度提升了87.1%。 5. 选取140只昆明雄性小鼠，体重为22.0±2.0g，进行适应性喂养，3d后依据体重随机分为14个组，依次设计高脂模型组，空白对照组，花生油的低剂量组、中剂量组、高剂量组，核桃油的低剂量组、中剂量组、高剂量组，亚油酸的低剂量组、中剂量组、高剂量组，亚麻酸的低剂量组、中剂量组、高剂量组，对其进行降血脂功能性研究，结果表明：（1）高脂模型组小鼠体重明显高于空白对照组（p<0.05）。在不同剂量花生油与核桃油中，高剂量组体重明显高于对应的中、低剂量组（p<0.05），不同剂量的核桃油组比花生油组能更显著降低小鼠体重。不同剂量亚油酸与亚麻酸组中，高剂量组体重显著低于中、低剂量组（p<0.05），且不同剂量亚麻酸降低小鼠体重更加明显。表明花生油、核桃油、亚油酸、亚麻酸均能有效降低高脂小鼠体重，且亚油酸与亚麻酸更优。（2）与高脂模型组相比，花生油、核桃油、亚油酸、亚麻酸均显著降低肝脏重量和肝脏系数（p<0.05）。核桃油降低肝脏重量和肝脏系数能力比花生油显著（p<0.05），且中、低剂量降低小鼠肝脏重量和肝脏系数显著高于高剂量。亚麻酸降低肝脏重量和肝脏系数较亚油酸显著（p<0.05），且高剂量显著高于中、低剂量。以亚油酸和亚麻酸对降低小鼠体内肝脏重量和肝脏系数作用最优。（3）不同剂量组小鼠体内血清中TC、TG水平均显著低于高脂模型组（p<0.05）。核桃油降低小鼠体内TC、TG水平能力较花生油强，且高剂量与中、低剂量相比差异显著（p<0.05）。亚麻酸降低血清TC、TG水平能力较亚油酸更高，高剂量组与中、低剂量组相比差异显著（p<0.05）。表明花生油、核桃油、亚油酸、亚麻酸可有效降低小鼠血清TC、TG水平，且亚油酸和亚麻酸降低能力更优。（4）花生油、核桃油、亚油酸、亚麻酸均可显著提高小鼠HDL-C水平（p<0.05），降低小鼠LDL-C水平（p<0.05）。核桃油比花生油效果为好，且核桃油高剂量更佳。亚麻酸优于亚油酸。表明花生油、亚油酸、核桃油以及亚麻酸可有效提高HDL-C水平，降低LDL-C水平，亚油酸和亚麻酸更具降低能力。（5）核桃油高、中、低剂量组差异性显著（p<0.05），且优于花生油。给小鼠连续灌胃28d不同剂量的亚麻酸后，小鼠动脉硬化指数（AI）指数明显下降，且比花生油、核桃油、亚油酸效果更佳。表明，花生油、核桃油、亚油酸、亚麻酸均有降低高脂饲料饲喂小鼠动脉硬化危险性的作用，且亚麻酸和亚油酸能力更优。