2017年海南大学农学院414植物生理学与生物化学考研仿真模拟题
● 摘要
一、名词解释
1. 单核哲酸多态性(single nucleotide polymorphism, SNP)
【答案】单核苷酸多态性是指在基因组水平上由单个核苷酸的变异所引起的DNA 序列多态性。它是人类可遗传的变异中最常见的一种,占所有已知多态性的90%以上。SNP 所表现的多态性只涉及单个碱基的变异,这种变异一般由单个碱基的转换或颠换引起。
2. 简并性(degeneracy )
【答案】简并性是指由一种以上密码子编码同一个氨基酸的现象,对应于同一氨基酸的密码子称为同义密码子 (synonymouscodon ) 。
3.
【答案】泛素(遍在蛋白)。泛素是指一种存在于大多数真核细胞中,主要功能是标记需要分解掉的蛋白质,使其被水解的小蛋白。
4. SDS 电泳(SDS-PAGE )
【答案】SDS 电泳(SDS-PAGE )是指根据SDS 和还原试剂将蛋白质分子解聚后亚基的大小,在恒定pH (碱性) 缓冲系统中分离的方法,主要用于测定蛋白质亚基分子质量。
5. 编码链(coding strand)
【答案】编码链是指DNA 双链中含编码蛋白质序列的那条链,与模板链互补,也称有义链(sensestrand )或正链。其序列与信使核糖核酸相同,只是信使核糖核酸中的U (尿嘧啶)组成与编码链中的T (胸腺嘧啶)组成相区别。
6. Edman 降解(Edman degradation)
【答案】Edman 降解是指由P. Edman于1950年首先提出来的,最初用于N 端氨基酸残基分析,现在用于肽端 氨基酸序列测定的实验技术,
其原理是异硫氰酸苯酯能与多肽或蛋白质的游离一末端氨基的反应,切下与之反应的那个氨基酸残基,这样蛋白质或多肽链就减少了一个残基,而且在它的N 端又暴露出一个新的游 离的α-末端氨基,又可参加第二轮反应,如此重复,就可以测出n 个残基的顺序。
7.
【答案】,是指一种利用非放射即荧光原位杂交技术(fluorescence in situ hybridization)
性的劳光信号对原位杂交样本进行检测的技术。它将荧光信号的高灵敏度、安全性,荧光信号的直观性和原位杂交的高准确性结合
起来,通过荧光标记的DNA 探针与待测样本的DNA 进行原位杂交,在荧光显微镜下对荧光信号进行辨别和计数,从而对染色体或基因异常的细胞、组织样本进行检测和诊断,为各种基因相关疾病的分型、预前和预后提供准确的依据。
8. 操纵子
【答案】操纵子是指原核生物基因中,多个功能上相关的结构基因串联排列在基因组序列中,构成信息区,连同上游启动区和操纵基因区及下游转录终止区一起构成的基因表达单位。
二、简答题
9. 简述真核细胞rRNA 、tRNA 和mRNA 转录使用的聚合酶及各RNA 前体(precursor )加工的基本过程。
【答案】(1)RNA 聚合酶(RNApolymerase )是指催化以DNA 为模板(template 、三磷酸核糖核普为底物、通过磷酸二酯键而聚合的合成RNA 的酶。RNA 聚合酶(RNApolymerase )的作用是转录RNA 。
(2)真核生物的RNA 聚合酶分三类:
①RNA 聚合酶I 存在于核仁中,转录rRNA
②RNA 聚合酶II 存在于核质中,转录mRNA , 需要“TA TA ”框。
③RNA 聚合酶III 存在于核质中,转录tRNA ,以及有些重复序列,如Alu 顺序可能也由这种酶转录。
(2) RNA 前体(precursor )加工:
①rRNA 加工的过程
a. 在端切除非编码的序列,生成41S 中间产物;
b.41SRNA 再被切割为两段,一段为32S ,另一段为20S ;
c.32S RNA 进一步被剪切成 28S rRNA 和 5.8S rRNA;
d.20S RNA 被剪切生成 18S rRNA。
②tRNA 的加工过程
a. 内含子的剪接;
b.3' 端添加CCA ;
c. 核苷酸修饰。
③mRNA 的加工过程
a.5' 端形成帽子结构;
b. 在链的3' 端切断并加上多聚腺苷酸(polyA )尾;
c. 通过拼接除去由内含子转录来的序列;
d. 链内部核苷被甲基化。
10.什么是DNA 的T m 值? 它受哪些因素的影响?
【答案】(1)DNA 的T m 值即DNA 的解链温度,是指DNA 在加热变性过程中,紫外光吸收值达到最大值的50%的温度,或者说是核酸分子内50%的双螺旋结构被破坏时的温度。
(2)影响Tm 值的因素:
①DNA 的均一性
均质DNA 的熔解过程发生在一个较小的温度范围内,异质DNA 熔解过程发生在一个较宽的温度范围内,均一性高,则融解过程爆发的温度范围窄;
②DNA 分子中G-C 碱基对的含量
在pH7.0,0.165mo1/L的NaCl 中,DNA 的Tm 值与G-C 含量之间有正比关系,DNA 分子中GC 含量高,则Tm 值大,两者的关系可表示为:Tm=69.3+0.41(%G+C)。测定Tm 值可推算DNA 中碱基的百分组成。
③DNA 溶液的离子强度
一般情况,离子强度较低的介质中,DNA 的解链温度较低,而且解链温度范围较宽。而在高离子强度时,DNA 的Tm 值较高,且解链发生在一个较小的温度范围内。
④DNA 溶液的pH 值
溶液的PH 值在5~9范围内,Tm 值变化不明显,当PH>11或PH<4时,Tm 值变化明显。 ⑤DNA 双链本身的长度
,Tm 值大小还与核酸分子的长度有关。 一定条件下(相对较短的核酸分子)
⑥变性剂
Tm 值变化明显。各种变性剂主要是干扰碱基堆积力和氢键的形成而降低Tm 值。核酸分子越
长,Tm 值越大。
11.如果一个基因与肿瘤的发生有关,如果设计实验以判断该基因是癌基因还是肿瘤抑制基因?
【答案】(1)检测该基因所表达蛋白在肿瘤组织中和正常细胞中的表达量。如果和正常组织相比,在癌细胞中该蛋白表达量很低甚至没有,该基因很可能是肿瘤抑制基因;如果先比之下癌组织中该蛋白高表达,则该基因是癌基因。
(2)进一步实验:敲除该基因在正常细胞系中的表达或抑制该基因表达,观察细胞转化的效果,与肿瘤组织进行比较分析。如果该基因被抑制以后,细胞分裂性增强,可初步确定该基因为肿瘤抑制基因;若减弱分裂则确定是癌基因。
12.简述RNA 的种类及其生物学功能。
【答案】生物体内主要有3种RNA
(1)信使RNA (mRNA )
mRNA 的功能是作为蛋白质翻译的模板,编码特定的蛋白质序列。也就是将DNA 上的遗传信息精确尤误地传录下来,以其上的碱基川如宇决定蛋白质的氨基酸顺序,完成基因表过程中的遗传信包传递过程。