题目：三种中草药多糖化学修饰前后对K562细胞的生长抑制作用研究

癌症是威胁人类健康的重大疾病之一，癌症产生的复杂性制约着癌症的有效治疗，目前，治疗癌症的主要手段有：手术治疗、放射治疗、化学治疗，而在药物治疗中，中草药由于本身的天然无毒性，相比化学药物，它减轻了化疗后的毒副作用，对于治疗癌症有着明显的优势。多糖是中草药植物的有效活性成份之一，众多研究表明：多糖以及多糖改性具有良好的抗肿瘤效果，本文选用麦冬、白术、防风3种中草药多糖，对其抗肿瘤效果做了一系列研究：
(1) 利用MTT法检测粗麦冬多糖POJ对白血病K562细胞的增殖抑制作用的影响，结果发现：超声和热水2种方法提取的POJ对K562细胞的增殖抑制作用都不明显，超提麦冬多糖UPOJ略高于水提麦冬多糖WPOJ的抗肿瘤活性；对以上2种多糖分别进行硫酸化、磷酸化、羧甲基化修饰，利用红外光谱法对修饰前后的POJ结构进行表征，结果显示：化学修饰后的UPOJ、WPOJ都分别出现硫酸基团、磷酸基团、羧甲基基团的特征吸收峰；同时对修饰后的UPOJ、WPOJ进行抗肿瘤活性检测，数据表明：修饰后的麦冬多糖不同程度地提高了其抗肿瘤活性，硫酸化超提麦冬多糖S-UPOJ抗肿瘤活性最强，羧甲基化超提麦冬多糖C-UPOJ次之。
(2) 对不同超声条件提取的12种白术多糖UAM进行抗肿瘤活性比较，结果显示：超声功率和频率对UAM的抗肿瘤活性均有影响，提取条件为80KHz、220W的UAM抗肿瘤活性较明显；对提取条件为80KHz、220W的UAM进行硫酸化、磷酸化、羧甲基化修饰，并利用紫外分光光度计对修饰后的UAM 进行取代度检测，数据表明：S-UAM取代度为90.03%，P-UAM取代度为87.46%，C-UAM取代度为91.23%；同时采用MTT法对硫酸化白术多糖S-UAM、磷酸化白术多糖P-UAM、羧甲基化白术多糖C-UAM进行抗肿瘤活性实验，数据分析得到：S-UAM对K562细胞的体外生长抑制作用最明显。
(3) 利用集落形成法和MTT法对超声提取的防风多糖USPS进行抗肿瘤活性检测，2种方法测试结果基本一致，USPS在药物浓度800µg/mL、72h时对K562细胞的抑制率最高24.761%；利用氯磺酸-吡啶法对USPS进行硫酸化，并利用原子力显微镜AFM对修饰前后的USPS作了形貌观测，USPS以高度聚集态存在，硫酸化防风多糖S-USPS相对分散，利用紫外分光光度计对S-USPS作了取代度检测，SO42﹣取代度为93.42%；并在倒置显微镜下观察了细胞形态的的变化，发现：S-USPS作用后的K562细胞出现分布不均匀，折光性差、形态不规则等症状；对S-USPS的抗氧化、抗肿瘤活性进行了分析，同USPS相比，S-USPS的抗氧化、抗肿瘤活性明显提高。