● 摘要
连翘叶黄酮的抗疲劳作用研究
黄亚亚
摘要 黄酮类化合物广泛的存在于自然界，尤其是植物中。有文献估计约有20％的中草药中含有黄酮类化合物，可见其资源之丰富。许多研究已表明黄酮类化合物具有多种生物活性，可以利用它抗菌、消炎、抗突变、降压、抗氧化、抗癌、防癌等。它是大多数氧自由基的清除剂，并且能升高过氧化物歧化酶（SOD）的活力，减少脂质过氧化物丙二醛（MDA）的生成。由于黄酮类化合物广泛的生物活性，从上世纪70年代以来，它的研究进入了一个新的阶段，掀起了黄酮类化合物研究、开发利用的热潮。目前，黄酮类化合物不仅用于多种疾病的防治，如治疗高血压、高血脂症、冠心病、心绞痛等，而且还在化妆品、食品等工业中被广泛的应用。
连翘是常用药材，传统以果实入药，但民间调查显示，连翘叶有消除便秘，预防感冒，降血脂，降血压等作用。国内已有研究者对连翘叶的化学成分进行了初步分析，并利用连翘叶制成茶叶作为滋补调理饮料应用。本实验室先前的研究也表明连翘叶总提取物有明显的体内、外抗氧化及保肝，降血压和抗疲劳的作用。
本实验以从连翘叶中提取的黄酮类化合物为对象，研究其对一次性运动损伤模型小鼠的抗疲劳作用。实验采用乙醇回流提取和聚酰胺柱层析法获得连翘叶黄酮；再将75只ICR雄性小鼠每组15只随机分为5组，分别为安静对照组、运动对照组、小剂量给药组、中剂量给药组和大剂量给药组；分别给小、中、大剂量组小鼠用同体积不同浓度的连翘叶黄酮灌胃，安静对照组和运动对照组均以同体积的生理盐水灌胃30天；力竭游泳恢复24小时后，取其中40只，眼球采血并取其肝脏、心脏、脑和股四头肌,分别检测血液中血红蛋白、血糖、血清尿素氮、血乳酸的含量和CAT的活性；检测肝脏和股四头肌的糖原含量；检测肝脏、心脏、脑和股四头肌中的MDA含量和SOD及肝脏和心脏的Cu/Zn-SOD活力；另外35只取其肝脏和心肌分别对其进行Cu/Zn-SOD的免疫组化染色观测；且对不同动物的肝脏、心肌和股四头肌，在其同一组织的同一部位取材，并用透射电子显微镜对其作了亚细胞形态上的观察。
实验结果：（1）连翘叶粗黄酮（FLF）得率为8.48％,其中含黄酮类化合物49.2％；（2）FLF能明显延长小鼠游泳至力竭的时间，尤其是大剂量给药组和中剂量给药组，其延长率分别为32.4%和29.8%；（3）FLF可以提高游泳恢复24小时后小鼠的肌糖原和肝糖原的含量；降低血乳酸和血清尿素氮的水平；（4）FLF可以提高血清CAT的活性；提高肝脏、心肌、脑和股四头肌的总SOD活性；降低肝脏、心肌、脑和股四头肌MDA的含量；（5）FLF可以提高肝脏和心肌Cu/Zn-SOD的活性，且能增加其在肝脏和心肌的表达量。（6）透射电镜结果显示，FLF对游泳力竭小鼠的肝细胞和心肌细胞有明显的保护作用。运动对照组的肝细胞和心肌细胞均因为力竭运动而遭到一定程度的损坏，但大剂量的FLF组的上述组织细胞却接近正常对照组。
结论：连翘叶中黄酮类化合物的含量丰富，其可以提高小鼠的运动能力，同时也能提高机体疲劳恢复的速度。本实验结果提示，FLF抗疲劳，提高运动能力与增强恢复的作用可能与其抗氧化作用相关。
关键词：连翘叶黄酮 抗疲劳 Cu/Zn-SOD 免疫组化测定 超微结构