题目：细胞外基质弹性对WB-F344细胞分化方向的影响

摘 要来源于大鼠的肝卵圆细胞系WB-F344具有双向分化潜能，在一定的生化刺激诱导条件下可分化为肝实质细胞和肝胆管上皮细胞，因此通常被用作研究肝祖细胞分化的离体模型。多种因素在诱导干、祖细胞分化中发挥作用，近期的研究表明，细胞外基质的力学性质可影响干细胞功能以及分化。力学环境广泛地存在于人和动物体内，它对肝细胞功能和分化的影响有待进一步研究。本文探讨了细胞外基质弹性对WB-F344增殖和分化的影响。通过调整丙烯酰胺浓度制备不同弹性的凝胶。采用岛津万能材料试验机测量凝胶的杨氏模量。根据肝组织的力学性质选用杨氏模量分别为1×103和1×105帕斯卡的凝胶作为培养细胞的基底。细胞培养7天后，在光镜下观察分析形态学变化；采用CCK-8检测其增殖情况；免疫荧光，RT-PCR检测白蛋白（ALB），细胞角蛋白18（CK18），细胞角蛋白19（CK19）和γ-谷氨酰转移酶（GGT）的表达，分析凝胶弹性对WB-F344分化方向的影响。结果表明细胞外基质的杨氏模量影响WB-F344的形态和增殖：在弹性较大基底上生长的WB-F344细胞铺展呈长梭形；弹性较小基底上的细胞则基本上呈圆形。细胞外基质的弹性对WB-F344细胞的分化方向有影响：在弹性较大基底上生长的WB-F344有向肝胆管上皮细胞分化的趋势；弹性较小基底上有向肝实质细胞分化的趋势。我们的研究表明，体外诱导肝干、祖细胞向肝实质细胞分化的过程中除了生化因素外，还需要考虑力学因素的作用。这些结果对组织工程体外大量扩增成体肝实质细胞具有潜在的应用价值。深入研究细胞微环境中生化、力学耦合因素对肝干细胞的分化将有助于提高干细胞诱导分化效率，因此具有重要意义。