2017年海南大学园艺园林学院414植物生理学与生物化学考研强化模拟题
● 摘要
一、名词解释
1. 感受态细胞(competent cell)
【答案】感受态细胞是指受体细胞经过一些特殊方法(如CaCL 等化学试剂)的处理后,细胞膜的通透性发生变化,成为能容许外源DNA 的载体分子通过的细胞。
2. SD 序列(Shine Dalgamo sequence)
【答案】SD 序列是指存在于原核生物mRNA 起始密码子上游7〜12个核苷酸的富含嘌呤的保守片段,能与 16SrRNA3' 端富含嘧啶的区域进行反向互补,所以可将mRNA 的AUG 起始密码子置于核糖体的适当位置以便起始翻译作用。
3. polysome
【答案】多核糖体。多核糖体是指蛋白质合成过程中结合在同一条mRNA 上的多个核糖体,能同时合成若干条蛋白质多肽链。
4. 拓扑异构酶(topoisomerase )
【答案】拓扑异构酶是指能在闭环DNA 分子中改变两条链的环绕次数的酶,其作用机制是先切断DNA ,让DNA 绕过断裂点以后再封闭形成双螺旋或超螺旋DNA 。
5. 顺式作用元件
【答案】顺式作用元件是指与结构基因表达调控相关、能够被基因调控蛋白特异性识别并结合的特异DNA 序列,包括启动子、上游启动子元件、增强子、沉默子等。
6. 穿梭载体(shuttle vector)
【答案】穿梭载体是指具有多个复制子能在两个以上的不同宿主细胞复制和繁殖的载体。
7.
【答案】,是指一种利用非放射即荧光原位杂交技术(fluorescence in situ hybridization)
性的劳光信号对原位杂交样本进行检测的技术。它将荧光信号的高灵敏度、安全性,荧光信号的直观性和原位杂交的高准确性结合
起来,通过荧光标记的DNA 探针与待测样本的DNA 进行原位杂交,在荧光显微镜下对荧光信号进行辨别和计数,从而对染色体或基因异常的细胞、组织样本进行检测和诊断,为各种基因相关疾病的分型、预前和预后提供准确的依据。
8.
【答案】泛素(遍在蛋白)。泛素是指一种存在于大多数真核细胞中,主要功能是标记需要分解掉的蛋白质,使其被水解的小蛋白。
二、简答题
9. 简述双脱氧链终止法进行DNA 测序的原理和方法。
【答案】(1)原理:双脱氧的核苷酸是人造的分子,这种分子糖环的基基团,而在天然分子中糖环的
互补配对原则是天然三磷酸核苷酸,用它的但是,若进入的核苷酸是双脱氧的,则由于
复制终止。
(2)方法:将待测序的单链DNA 的模板、引物、四种单脱氧碱基和DNA 聚合酶分成四管,在四管反应系 统中分别按比例引入四种双脱氧碱基,只要双脱氧碱基掺入链端,该链就停止延长,链端掺入单脱氧碱基的片段
可继续延长。如此每管反应体系中便合成以共同引物为
脱氧碱基为
,根据片段
不一的核酸片段(长度相邻者仅差一个碱基)
片段的碱基排列顺序。
10.细胞通过哪几种修复系统对DNA 损伤进行修复?
【答案】细胞可以通过错配修复、重组修复、切除修复、直接修复和SOS 反应等修复系统对DNA 损伤进行修复。
(1)错配修复
①当复制叉通过复制起始点,母链DNA 就被甲基化。
②一旦在DNA 复制过程中发生错配,细胞能够通过准确的错配修复系统将其识别,并加以校正。
DNA 子链中的错配几乎完全能被修正,充分反映了母链序列的重要性。
(2)切除修复
①碱基切除修复
a. 不同类型的糖苷水解酶特异性识别并切除受损核苷酸上的N-β糖苷键,在DNA 链上形成AP 位点;
b.AP 核酸内切酶把受损核苷酸的糖苷—磷酸键切开,并移去包括AP 位点核苷酸在内的小片段DNA ;
c. 再由DNA 聚合酶I 合成新的片段,DNA 连接酶连成新的被修复的DNA 链。
②核苷酸切除修复
a. 首先DNA 切割酶在己损伤的核苷酸5' 和3' 位分别切开磷酸糖苷键,产生一个核苷酸小片段; b. 移去小片段后由DNA 聚合酶I (原核)或(真核)合成新的片段,并由DNA 连接酶完端,以双端的一系列长度不等的核酸片段。反应终止后,分四个泳道进行电泳,以分离长短端的双脱氧碱基,便可依次阅读合成和碳上都没有了轻g 基连接。碳上有一个羟基。在DNA 复制过程中,新掺入的碱基按碱基磷酸基团同生长链的前一个核苷酸的没有羟基而影响下一个磷酸二酯键的形成,导致DNA
成修复。
(3)重组修复
,发生在复制之后。 重组修复又被称为“复制后修复”
①机体细胞对在复制起始时尚未修复的DNA 损伤部位可以先跳过该损伤部位完成全部链复制后再进行修复。
②先从同源DNA 母链上将相应核苷酸序列片段移至子链缺口。
③再用新合成的序列补上母链空缺。
(4)DNA 的直接修复
直接修复是把损伤的碱基回复到原来状态的一种修复,最普遍的是利用光进行修复。
(5)SOS 反应
SOS 反应是细胞DNA 受到损伤或复制系统受到抑制的紧急情况下,细胞为求生存而产生的一种应急措施。SOS 反应包括
①诱导DNA 损伤修复;
②诱变效应;
③细胞分裂的抑制;
④溶原性细菌释放噬菌体等。
11.什么是蛋白质组学?什么是转录组学?简述这两个领域里最主要的研究手段。
【答案】(1)蛋白质组学是指在蛋白质组水平上研究蛋白质的特征,包括蛋白质的表达水平、翻译与修饰、蛋白质与蛋白质的相互作用等,由此获得关于疾病发生、发展及细胞代谢等过程整体认识的学科。目前常用的蛋白质组学研究手段有:
①质谱分析技术(MS );
②蛋白质芯片技术。
(2)转录组学是指研究生物细胞中转录组的发生和变化规律的科学。目前用于转录组数的研究方法主要有:
①基于杂交技术的芯片技术,包括CDNA 芯片和寡聚核苷酸芯片;
②基于序列分析的基因表达系列分析SAGE ;
③大规模平行信号测序系统MPSS 。
12.遗传信息在复制、转录和翻译过程中的准确性分别是如何实现的?
【答案】(1)复制过程中DNA 聚合酶除了合成新的DNA 链外还有校正功能,复制过程中还存在许多修复系统,以保证复制的准确性和高保真度。
(2)真核生物转录过程中,需要一些被称为转录调控因子的辅助蛋白按特定顺序结合于启动子上,RNA 聚合酶才能与之结合并形成复杂的转录起始复合物,以保证转录有效起始。原核生物RNA 聚合酶中因子可增加聚合酶对启动子的亲和力,还降低了它对非专一位点的亲和力,调控基因的转录起始。