2018年首都医科大学脑重大疾病研究院306西医综合之生物化学考研核心题库
● 摘要
一、名词解释
1． cDNA 文库（cDNA library）。
【答案】以mRNA 为模板，利用反转录酶合成与mRNA 互补的DNA 称为cDNA , 单链的eDNA 再复制双链的 DNA 片段，与适当的载体连接后，转入受体菌，所建立的文库称为cDNA 文库。
2． 联合脱氨基作用（transcleamination ）。
【答案】联合脱氨基作用是转氨基作用和L-谷氨酸氧化脱氨基作用的联合反应。氨基酸与酮戊二酸经转氨作用生成or 酮酸和谷氨酸，后者经L-谷氨酸脱氢酶作用脱去氨基的过程。
3． 整合蛋白。
【答案】整合蛋白是指嵌入膜脂双分子层中的膜蛋白。
4． 回复突变（re verse mutation / back mutation）。
【答案】回复突变是指发生在起始突变位点上，使原来的野生型表型得到恢复的第二次突变。
5．
氧化（Oxidation ） 脂酸在远离梭基的烷基末端碳原子被氧化成轻基，再进一
二羧酸的过程。 【答案】氧化是步氧化而成为梭基，生成
6． 第二信使。
【答案】第二信使是指细胞外第一信使与其特异受体结合后，通过信息跨膜传递机制激活的受体，刺激膜内特定 的效应酶或离子道，而在胞浆内产生的信使物质。这种胞内信息分子起到将胞外信息传导、放大、变为细胞内信息的作用，包括环磷酸腺苷（cAMP ）、环磷酸鸟苷（cGMP ）、三磷酸肌醇（IP3）、二酰基甘油（DG ）等。
7． 必需脂肪酸（essential fatty acid）
【答案】必需脂肪酸是指人体生长所必需但又不能自身合成，必须从食物中摄取的脂酸。在脂肪中有三种脂酸是人体所必需的，即亚油酸、亚麻酸、花生四烯酸。
8． 异肽键。
【答案】异肽键（isopeptide bond）是指两个氨基酸通过侧链羧基或侧链氨基形成的肽键。
二、问答题
9． DNA 样品为线形的双螺旋。取部分样品涂布在栅板上，温度维持在
双螺旋结构没有变化。另取部分样品进行同样的操作，只是温度为
提供什么信息？ 【答案】用电子显微镜观察，后，用电子显微镜观察，发现线形的双螺旋中出现了一些形（也称为“眼”形）结构，请解释此现象。这种现象能形结构是由于双螺旋DNA 局部片段解旋形成的。这些片段富含A-T 碱基对，A-T 比G-C 的热稳定性差。用这种方法可以检测DNA 双螺旋链中碱基组成上的差别。
10．蛋白质工程与基因工程的区别是什么？
【答案】基因工程要解决的问题是把天然存在的蛋白质通过克隆基因大量地生产出来；
蛋白质工程则致力于对天然蛋白质的改造，制备各种定做的新蛋白质。蛋白质工程是按照以下思路进行的：确定蛋白质的功能→蛋白质应有的高级结构→蛋白质应具备的折叠状态→应有的氨基酸序列→应有的碱基排列，可以创造自然界不存在的蛋白质。
11．为什么抑制大肠杆菌DNA 旋转酶（gyrase ）的活性，会抑制乳糖操纵子的转录活性？
【答案】乳糖操纵子受到阻遏蛋白和CAP （降解物激活蛋白）的双重调节。CAP 和cAMP 形成的复合物可以与乳糖操纵子基因上游的CAP 结合位点结合，促进基因转录。CAP 是一种二聚体的激活蛋白，与cAMP 结合以后， 其构象发生变化，从而能够与CAP 结合位点结合。CAP 结合位点是DNA 上一段长为30bp 的特殊的回文排列。 CAP-cAMP 复合物结合以后，诱导这段DNA 环绕其上，并弯曲约的角。这种弯曲在刺激RNA 聚合酶活性方面起着重要的作用。作为即旋转酶可能参与调节此处DNA 的弯曲。因此抑制它的DNA 大肠杆菌细胞内的拓扑异构酶
旋转酶的活性会抑制乳糖操纵子的转录。
12．在用定磷法测量核酸含量中，总磷如何测定？有机磷如何测定？
【答案】在定磷法实验中，核酸样品经硫酸水解，有机憐全部转变成无机磷，然后用钼酸铵法测定其含量，即确定样品的总磷含量。核酸样品不水解，直接用钼酸铵法测定磷含量，即确定样品的无机磷含量。总磷含量与无机磷含量的差值即为有机磷含量。
13．丙酮酸是一个重要的中间物，简要写出以丙酮酸为底物的5个不同的酶促反应。
【答案】丙酮酸是一个重要的中间代谢物，其去向随机体所处条件而异，不仅能直接参与糖类代谢，还可以间接参与脂类和蛋白质代谢等。
14．简述嘌呤霉素对多肽合成的抑制作用。
【答案】嘌呤霉素的结构与酷氨酰端上的残基的结构十分相似。它能合核糖体A
上的肽酰基，形成肽酰嘌呤霉素，但其位结合，并能在肽酰转移酶的催化下。接受P
位肽酰
断。
许多蛋白质合成抑制剂具有高度专一性，特别是抗生素，在蛋白质合成研宄中是一个有力的工具。这类抑制剂都能特异地抑制蛋白质合成的某个步骤，由此可以阐明蛋白质生物合成的机制。嘌呤霉素是酪氨酰的类似物，具有某种竞争抑制的性质。
15．线粒体基质中形成的乙酰CoA 是如何进入细胞质中参加脂肪酸的合成的？
【答案】线粒体基质内形成的乙酰CoA 不能直接通过线粒体膜进入细胞质，而需要其他物质携带，它可以通过柠檬酸穿梭透过线粒体膜，而进入细胞质。
在线粒体中，乙酰CoA 与草酰乙酸经TCA 形成柠檬酸，柠檬酸透过线粒体膜到达细胞质后被柠檬酸裂解酶作用生成乙酰CoA 和草酰乙酸，乙酰CoA 则参与脂肪酸的合成，而草酰乙酸经过苹果酸脱氢酶和苹果酸酶作用生成丙酮酸，进入线粒体参与TCA 形成草酰乙酸，再进行下一轮的乙酰CoA 转运过程。
16．如何证明提取到的某种核酸是DNA 还是RNA? 如果证明该核酸是DNA ，那怎么确定DNA 是否有RNA 或蛋白质的污染？
【答案】区分DNA 和RNA 最简单的方法是碱水解，DNA 不能被碱水解，RNA 易被碱水解，只要检测核酸样品 碱水解后有无核苷酸释放即可。一般用
作用18 h。如果证明该核酸是DNA ，测定
纯制品的 在到的KOH （或NaOH ）室温DNA 即可判断其中是否有RNA 或蛋白质污染，联建不是酯键而是酰肽键。肽酰-嘌呤霉素复合物很易从核糖体上脱落，从而使蛋白质合成过程中之间，若混有RNA ，则该比值升高，若混有蛋白质则该比值降低。
三、论述题
17．试说明丙氨酸转变为葡萄糖的过程，写出关键步骤与酶。
【答案】丙氨酸通过谷丙转氨酶脱去氨基形成丙酮酸；丙酮酸进入线粒体，然后在丙酮酸羧化酶的作用下，形成草酰乙酸，草酰乙酸在谷草转氨酶的作用下形成天冬氨酸；天冬氨酸可以通过线粒体膜进入细胞质中，在细胞质中的谷草转氨酶作用下再次形成草酰乙酸；草酰乙酸在PEP 羧激酶作用下形成磷酸烯醇式丙酮酸（PEP ）, PEP 可以转化为3-磷酸甘油醛和磷酸二羟丙酮，后
两者缩合形成
在磷酸酯酶作用下形成F-6-P ，后者转化为G-6-P ，G-6-P 在G-6-P 磷酸酯酶作用下形成葡萄糖。
关键步骤有：丙氨酸在谷丙转氨酶作用下转化为丙酮酸；丙酮酸在丙酮酸羧化酶、PEP 羧激酶作用下形成
形成葡萄糖。
在磷酸酯酶作用下形成F-6-P ; G-6-P 在G-6-P 磷酸酯酶作用下
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