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一、名词解释

1． 核酸内切酶（endonuclease ）与核酸外切酶（exonuclease ）。

【答案】核酸内切酶是核糖核酸酶和脱氧核糖核酸酶中能够水解核酸分子内磷酸二酯键的酶。

核酸外切酶是从核酸链的一端逐个水解核苷酸的酶。

2． 螺旋。 【答案】螺旋是蛋白质中最常见的一种二级结构，肽链主链骨架围绕中心轴盘绕成螺旋状。

在螺旋结构中，每3.6个氨基酸残基螺旋上升一圈，每圈的高度为0.54nm 。每个氨基酸残基沿轴上升0.15nm ，沿轴旋转100°。在同一肽链内相邻的螺圈之间形成氢键，氢键的取向几乎与中心轴平行，氢键是由第n 个氨基酸残基的CO 基的氧与第

的。螺旋的稳定性靠氢键来维持。

3． 流体镶嵌模型。

【答案】流动镶嵌模型是针对生物膜的结构提出的一种模型。在这个模型中，生物膜被描述成镶嵌有蛋白质的流体脂双层，脂双层在结构和功能上都表现出不对称性。有的蛋白质“镶”在脂双层表面，有的则部分或全部嵌入其内部，有的则横跨整个膜。另外，脂和膜蛋白都可以进行侧向扩散。

4． 核酶。

【答案】核酶是指一些具有催化功能，可以催化自我拼接等反应，具有催化作用的RNA 。

5． 脂多糖（lipopolysaccharide ）。

【答案】脂多糖是革兰氏阴性细菌细胞壁特有的结构成分，种类很多，分子结构一般由外层专一性寡糖链、中心多糖链和脂质三部分组成。

6． 肽键（peptidebond ）。

【答案】肽键是由一个氨基酸的氨基与另一个氨基酸的羧基失水缩合而形成的酰胺键，是肽和蛋白质一级结构的基本化学键。

7． 分子杂交（hybridization ）。

【答案】杂交分子是指当两条不同来源的DNA （或RNA ）链或DNA 链与RNA 链之间存在互补顺序时，在一定条件下可以发生互补配对形成的双螺旋分子，形成杂交分子的过程称为分子

第 2 页，共 30 页 个氨基酸残基的NH 基的氢之间形成

杂交。

8． 谷胱甘肽。

【答案】谷胱甘肽是存在于动植物和微生物肽键，由谷氨酸的竣基与半胱氨酸的氨基缩合而成。显然这与蛋白质分子中的肽键不同。由于GSH 中含有一个活泼的疏基，很容易氧化，二分子GSH 脱氢以二硫键相连形成 氧化型的谷胱甘肽（GSSG ）。

二、问答题

9． 根据结构与催化机制（而不是根据被驱动的离子类型），说出三类驱动离子的ATP 酶名称。

【答案】三类驱动离子的ATP 酶，即P 型荥、F 型栗和V 型泵。它们的基本功能是通过水解ATP 提供的能量转运离子，或是通过离子梯度合成ATP 。P 型栗或P 型ATPase ，运输时需要磷酸化，包括泵V 型栗或V 型ATPase , 主要位于小泡的膜上，泵；如溶酶体膜中的泵，运输时需A TP 供能，但不需要磷酸化；F 型泵或F 型ATPase , 这种泵主要存在于细菌质膜、线粒体膜和叶绿体膜中，它们在能量转换中起重要作用，是氧化磷酸化或光合磷酸化偶联因子。F 泵工作时不消耗ATP , 而是将ADP 转化成ATP , 但是它们在一定条件下也会具有A TPase 活性。

10．生产中将蔗糖酶称为转化酶，因为蔗糖酶水解蔗糖时，蔗糖溶液的旋光度发生变化，由正变负。请问为什么？

【答案】蔗糖的为+66.5°, 经水解后，由于水解产物果糖的为一92.4°，比另一水+52.2°的绝对值大，因此使水解液具有左旋性。 解产物葡萄糖的

11．列举多肽激素以非活性前体的形式被合成的好处。

【答案】多肽激素以前体的形式被合成有以下几个方面的好处：（1）储存；（2）激素活性的调节；（3）多肽链正确的折叠；（4）信号肽序列帮助多肽或蛋白质的正确定向和分检。

12．一种tRNA 有可能适应所有的亮氨酸密码子吗？

【答案】亮氨酸有六个密码子，摆动学说允许密码子第三位最多有三个不同的核苷酸与反密码子第一位的同一个核苷酸相互作用。亮氨酸有六个密码子的事实意味着它们除了第三位的核苷酸外，其他位置的核苷酸也存在不同，因此，一个特定tRNA 分子的反密码子不可能识别亮氨酸的六个不同的密码子。

13．在体外进行DNA 复制实验时，如果将大肠杆菌DNA 聚合酶I 与T7 DNA保温20min 以后，加入大量T3 DNA。如果改用大肠杆菌DNA 聚合酶III 取代大肠杆菌DNA 聚合酶I 进行上述实验，则得到的主要是T7 DNA。请解释原因。

【答案】大肠杆菌DNA 聚合酶I 和DNA 聚合酶III 的进行性不同，前者只有后者高达500000 nt。进行性低意味着DNA 聚合酶I 在催化DNA 复制过程中很容易与模板解离，进行性高则意味着DNA 聚合酶III 可以 在模板上连续合成更长的DNA 。使用DNA 聚合酶I 进行实验

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时，因为它的进行性低，合成一小段DNA 以后， 就与原来的T7 DNA模板解离，在加入大量的T3 DNA以后，DNA 聚合酶I 很难与原来的模板结合，反而更容易与量多的T3 DNA结合，复制T3 DNA，于是被合成的DNA 主要是T3 DNA; 使用DNA 聚合酶III 进行实验时， 因为它的进行性极高，故在有限的时间内，DNA 聚合酶III 几乎不会离开原来的模板T7 DNA，即使加入的T3 DNA 量再多，对原来的T7DNA 复制也没有影响，因此最后合成的DNA 主要是T7DNA 。

14．用什么试剂可将胰岛素链间的二硫键打开与还原？如果要打开牛胰核糖核酸酶链内的二硫键，则在反应体系中还必须加入什么试剂？蛋白质变性时为防止生成的

入什么试剂来保护？

【答案】最常用的打开二硫键的方法是使用巯基试剂，例如巯基乙酵，可使参与二硫键的2个半胱氨酸还原为带 有游离巯基的半胱氨酸，为了使还原反应能顺利进行，通常加入一些变性剂，如高浓度的尿素等。加入过量的还 原剂可以防止还原所得的疏基被重新氧化。如果不准备使肽链重新氧化，而是进一步进行结构化学结构的研究，可以将巯基转化为其它的修饰形式，例如和羧甲基化等烷化剂反应。

在蛋白质分子中，由于二硫键的作用，可以使两条以上的肽链相连，也可以使肽链卷曲成环状。在进行蛋白质一级结构的测定时，无论是链间或链内的二硫键都必须拆开，使各条肽链彼此分离或伸展，方可测定。拆开二硫键的方法，有氧化法和还原法两种。

（1）氧化法：二硫键的断裂通常用过甲酸（即过氧化氢+甲酸）氧化法将二硫键氧化成磺酸基。

（2）还原法：最普遍的方法，就是答案所使用的方法

15．为何耐热性的DNA 聚合酶在聚合酶链反应中具有很重要的地位？

【答案】聚合酶链反应的步骤需要使用较高的温度，使用耐热的RNA 聚合酶可以避免每一轮扩增时都补充新的聚合酶。如果聚合酶不耐热，补充新酶将是不可避免的。

16．下图是一个带有单链末端的双链DNA 分子，分别写出用大肠杆菌DNA 聚合酶

理后得到 的延伸产物并简单解释原因。

【答案】大肠杆菌DNA 聚合酶III 处理后的产物为：

端粒酶处理后的产物为：

DNA 聚合酶III 跟大多数其他DNA 聚合酶一样，需要模板和引物，所以从下面一条链的端开始延伸

DNA 链；端粒酶本身由蛋白质和RNA 两种组分组成，其中RNA 部分的一段可以作为模板，因此端粒酶可以在DNA 的凸出末端添加DNA 序列。

第 4 页，共 30 页 基重新被氧化，可加或端粒酶处