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2018年武汉大学生命科学学院885分子生物学之现代分子生物学考研仿真模拟五套题

  摘要

一、名词解释

1. DNA 复性(DNA renaturation)

【答案】DNA 复性是指DNA 双螺旋变性后的两条互补单链重新恢复成双螺旋结构的过程。

2. polysome

【答案】多核糖体。多核糖体是指蛋白质合成过程中结合在同一条mRNA 上的多个核糖体,能同时合成若干条蛋白质多肽链。

3. SDS 电泳(SDS-PAGE )

【答案】SDS 电泳(SDS-PAGE )是指根据SDS 和还原试剂将蛋白质分子解聚后亚基的大小,在恒定pH (碱性) 缓冲系统中分离的方法,主要用于测定蛋白质亚基分子质量。

4. 双向电泳

【答案】双向电泳是指将样品进行电泳后,在它的直角方向再进行一次电泳,为了不同的目的而采用不同的组合 方式的分离方法,目前双向电泳大多是指第一向为等电聚焦,平衡后,第二向为SDS 电泳。

5.

【答案】即荧光原位杂交技术(fluorescence in situ hybridization ),是指一种利用非放射性的劳光信号对原位杂交样本进行检测的技术。它将荧光信号的高灵敏度、安全性,荧光信号的直观性和原位杂交的高准确性结合

起来,通过荧光标记的DNA 探针与待测样本的DNA 进行原位杂交,在荧光显微镜下对荧光信号进行辨别和计数,从而对染色体或基因异常的细胞、组织样本进行检测和诊断,为各种基因相关疾病的分型、预前和预后提供准确的依据。

6. YAC

【答案】酵母人工染色体。酵母人工染色体是指一种能够克隆长达400Kb 的DNA 片段的载体,含有酵母细胞中 必需的端粒、着丝点和复制起始序列,可用于基因组大片段库构建。

7. 阻遏蛋白

【答案】阻遏蛋白是指一类在转录水平对基因表达产生负控作用的蛋白质,在一定条件下与

DNA 结合,一般具有诱导和阻遏两种类型。

8. 反式作用因子

【答案】反式作用因子是指通过直接结合或间接作用于DNA 、RNA 等核酸分子,对基因表达发挥不同调节作用 (激活或抑制:)的各类蛋内质因子的总称,也称反式作用元件。

二、简答题

9. 简述技术进行转录组学分析的原理。

定义

是指利用高通量测序技术对转录组进行测序分析,对测序得到的大量原始读长进行

过滤、组装及 生物信息学分析的过程。

(2)进行转录组分析的原理

对于有参考基因组序列的物种,需要根据参考序列进行组装,对于没有参考序列的,需要进行从头组装,利 用大量读长之间重叠覆盖和成对读长的相对位置关系,组装得到尽可能完整的转录本,并以单位长度转录本上覆 盖的读长数目作为衡量基因表达水平的标准。

10.简述RNA 转录的概念及其基本过程。

【答案】转录是指以DNA 的一条链为模板,在RNA 聚合酶的作用下,依据碱基配对原则,合成一条与DNA 模板链的一定区段互补的RNA 链的过程,即遗传信息、由DNA 流向RNA 的过程。

无论是原核细胞还是真核细胞,转录的基本过程都包括以下几个步骤:

(1)模板识别

模板识别是指RNA 聚合酶与启动子DNA 双链相互作用并与之相结合的过程。

(2)转录起始

①RNA 聚合酶全酶与启动子可逆性结合形成封闭复合物,此时的DNA 链仍处于双链状态; ②封闭复合物转变成开放复合物,聚合酶全酶结合的DNA 序列中有一小段双链被解开; ③开放复合物与最初的两个NTP 相结合并在这两个核苷酸之间形成磷酸二酯键后转变成包括RNA 聚合酶、DNA 和新生RNA 的三元复合物。

(3)转录延伸

转录延伸阶段是RNA 聚合酶离开启动子,即6因子从全酶上脱离后,余下的核心酶沿模板DNA 链移动,并按照碱基互补原则,不断聚合RNA 的过程。

(4)转录终止

转录终止是指RN Α-DNA 杂合物分离,转录泡瓦解,DNA 恢复成双链状态,RNA 聚合酶和RNA 链都被从模板上释放出来的过程。即包括停止延伸及释放RNA 聚合酶和合成RNA 。 【答案】(1)

11.按照拷贝数(或重复频率)以及基因的结构和功能,基因组中的基因可分为哪些种类?

【答案】(1)按照拷贝数或重复频率,基因组中的基因可分为三种:

①单拷贝序列(稀有基因)

②中度重复序列(中等丰度基因)

③高度重复序列(高丰度基因)

(2)按照结构和功能,基因组中的基因可分为六种:

①编码RNA 的基因

②编码蛋白质的基因

③基因家族与基因簇

④异常结构基因

a. 重叠基因

b. 基因套基因

c. 反义基因

⑤假基因

⑥移动基因(转座子)

12.核酶具有哪些结构特点? 根据其催化功能的不同可分为哪两大类? 其生物学意义是什么?

【答案】(1)核酶是指一类具有催化功能的RNA 、分子,通过催化靶位点RNA 链中磷酸二酯键的断裂,特异性地剪切底物RNA 分子,从而阻断基因的表达。其结构特点:

①核酶具有较稳定的空间结构,不易受到RNA 酶的攻击。

②能形成锤头结构。典型的锤头结构是由11~13个保守的核苷酸和三个茎构成,而茎区是由互补碱基构成的局部双链结构,将保守的核苷酸包围着构成的催化中心;

③能形成发夹结构。典型的发夹型结构是由50个核苷酸组成,包括四个螺旋区、三个连接区和两个环。

(2)根据其催化功能的不同,可将核酶分为剪切型核酶和剪接型核酶两大类:

①剪切型核酶:只剪切不连接,它能够催化自身RNA 或切下不同的RNA 分子特异的核苷酸序列;

RNA 连接酶等多种酶的活性,②剪接型核酶:具有序列特异性的内切核酸酶、它既能切割RNA

分子,也能通过转酷反应形成新的磷酸二酷键,将切割后的RNA 分子连接起来。

(3)核酶的生物学意义

①RNA 、为生物催化剂,具有重要生物学意义。

②打破了传统上认为的酶是蛋白质的观念。

③在生命起源问题上,为先有核酸的假说提供了依据。

④为破坏有害基因、治疗肿瘤等疾病提供手段。