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一、名词解释

1． 亲和层析、离子交换层析。

【答案】亲和层析是指利用共价连接有特异配体的层析介质分离蛋白质混合物中能特异结合配体的目的蛋白或其他分子的层析技术。

离子交换层析是指使用带有固定的带电基团的聚合树脂或凝胶层析柱分离离子化合物的层析方法。

2． 转录因子（transcriptionfactor ）。

【答案】转录因子是指帮助真核生物RNA 聚合酶识别启动子的蛋白质因子。三种RNA 聚合酶都需要转录因子， 有些是三种酶共有的，有些则是各RNA 聚合酶特有的。

3． 无规卷曲。

【答案】无规卷曲，又称卷曲（coil ），是指在蛋白质中，没有一定规则，结构比较松散的一些肽段的结构。

4．

【答案】（泛紊）又称泛肽，是由76个氨基酸组成的高度保守的小分子蛋白，它广泛存在于各种细胞，故名泛素。泛素在真核细胞中的含量尤为丰富，负责标记待分解的蛋白质，介导其选择性降解。泛素在蛋白定位、细胞周期、凋亡、代谢调节、免疫应答、信号传递、转录

调控、应激反应以及

5． 磷酸单酯键。 修复等生命活动中发挥重要作用。

【答案】磷酸单酯键是单核苷酸分子中，核苷的戊糖与磷酸的羟基之间形成的磷酸酯键。

6． 拼接体（spliceosome ）。

【答案】拼接体是由mRNA 前体、各种拼接因子、5种snRNP 等在细胞核内按照一定次序组装起来的超分子复合物，是拼接反应发生的场所。

7． Southernblotting 。

【答案】Southernblotting 即DNA 印迹，是指双链DNA 在凝胶电泳后变性为单链，转移并固定到特定滤膜（如硝酸纤维素膜）上，同标记的核酸探针杂交，根据杂交信号显示靶DNA 的存

在与位置。DNA 印迹可用于检测基因突变。

8． DNA

变性

【答案】DNA 变性是指DNA 双链解链，分离成两条单链的现象，不破坏一级结构，而生物功能发生降低或消失。

二、问答题

9． 生物体内重要的一碳基团有哪些？哪些氨基酸可提供一碳基团？

【答案】在代谢过程中，某些化合物可以分解产生具有一个碳原子的基团，称为“一碳基团”或“一碳单位”。常见的一碳基团有：

亚氨甲基

亚甲基

次甲基甲酰基

甲基

羟甲基

许多氨基酸都和一碳基团有关，如甘氨酸、丝氨

酸、苏氨酸、组氨酸等，都可作为一碳基团的供体。

10．什么叫别构效应？以血红蛋白为例说明别构效应与蛋白质功能的关系。

【答案】别构效应是指生物体中具有1个以上亚基的蛋白质，在不同生理过程中，当其中一个亚基与小分子物质结合后，不仅该亚基的立体结构发生变化，而且随即引起其他亚基在立体结构上发生相应变化，从而最终改变蛋白质生物活性的现象，别构效应是生物体代谢调节的重要方式之一。

血红蛋白有四个亚基，

它们都是多次折叠卷曲起来的肽链。两个为链，

两个为链。以表示。脱氧血红蛋白由于分子内可形成八对盐桥，分子的构象受到约束，较为稳定，因而和氧的

结合能力弱。当一个

亚基和

暴露出来，

使得一个

增加另一对结合后部分盐桥被破坏，某些氨基酸发生移位，与氧结合点随即的亲和力增加，

而当这一对

亚基与结合后，就

亚基构象改变，

对亚基构象改变的程度和对氧的亲和力，使得后一对亚基与氧反应的平衡常数增加五倍。氧合后，血红蛋白构象发生很大变化，使得氧合能力大大提高。

11．为什么抑制大肠杆菌DNA 旋转酶（gyrase ）的活性，会抑制乳糖操纵子的转录活性？

【答案】乳糖操纵子受到阻遏蛋白和CAP （降解物激活蛋白）的双重调节。CAP 和cAMP 形成的复合物可以与乳糖操纵子基因上游的CAP 结合位点结合，促进基因转录。CAP 是一种二聚体的激活蛋白，与cAMP 结合以后， 其构象发生变化，从而能够与CAP 结合位点结合。CAP 结合位点是DNA 上一段长为30bp 的特殊的回文排列。 CAP-cAMP 复合物结合以后，诱导这段DNA 环绕其上，

并弯曲约的角。这种弯曲在刺激RNA 聚合酶活性方面起着重要的作用。作为

即旋转酶可能参与调节此处DNA 的弯曲。因此抑制它的DNA 大肠杆菌细胞内的拓扑异构酶

旋转酶的活性会抑制乳糖操纵子的转录。

12．在抗霉素A 存在情况下，计算哺乳动物肝脏在有氧条件下氧化1分子软脂酸所净产生ATP 的数目，如果安密妥存在，情况又如何？

【答案】1分子软脂酸经7

轮氧化，产生7

分子和7分子NADH 及8分子的乙酰

以及1分子GTP （相当

氧化磷酸化产生CoA ; 1分子的乙酰CoA 经TCA 循环产生3分子NADH 和1

分子的于1分子A TP ）; 1分子NADH

氧化磷酸化产生

分子A TP 。

（1）抗霉素A 存在时，

能抑制电子从还原型泛醌到细胞色素

链和

消耗的2个A TP ，净得6个A TP 。

（2）安密妥能阻断电子从NADH 向泛醌的传递，所以其能抑制NADH 呼吸链，而对

呼吸链无抑制作用。即安密妥存在时1分子软脂酸氧化产生A TP 的数目是

：

13．八肽有AA 组成为Asp 、Ser 、Gly 、Ala 、Met 、Phe 、Lys2。

（1）FDNB 与之反应再酸水解，得DNP-Ala 。

（2）胰凝乳蛋白酶消化后分出一个四肽，其组成为Asp ，Gly ，Lys 和Met , 此四肽与FDNB 反应生产DNP-Gly 。

（3）胰蛋白酶消化八肽后，得到组成为Lys 、Ala 、Ser 及Phe 、Lys 、Gly 的两个三肽及一个二肽，此二肽被处理游离出Asp 。请写出八肽的顺序及推理过程。

中间的肽段序列为

二肽被处理后游【答案】由结果（1）可得知此肽的N 端是Ala ; 由结果（2）可知C

端四肽分别是由结果（3）可知N

端的三肽序列为

离出自由天冬氨酸，

这提示了这二肽的顺序为整的八肽顺序为

：而且没有碱性残基。因此，整个肽链的完的传递，所以对NADH 呼吸

呼吸链均有抑制。1分子软脂酸在抗霉素A 存在时只能产生8分子A TP ，减去活化时分子A TP ; 1

分子的各化学试剂和酶试剂在多肽链上的作用位点如图所示：

图

14．通常DNA 是遗传信息的载体，简述保持DNA 结构稳定的主要机制。

【答案】（l ）DNA 的基本单位，即脱氧核糖核酸其化学性质相对稳定，构成DNA 后，几乎无较强活性的基团，避免与外界发生反应；

（2）DNA 本身的双螺旋结构，依靠其准确的GC 、A T 配对所构建的双螺旋结构极其稳定，并保持其配对和复制、转录的正确率；

（3）对真核生物DNA , 还有染色体蛋白与DNA 结合，构成结构更为复杂的染色体，进一步在理化性质上稳定DNA ;