● 摘要
精子发生受多种内外界因素的影响，性类固醇激素是主要的调节因素。本研究运用组织学方法对北方山溪鲵和隆肛蛙每个月精巢的组织结构进行了系统的观察，以揭示其精子发生和精巢发育的年周期变化；并首次运用免疫组织化学方法观察了睾酮、雌二醇、孕酮三种类固醇激素及其受体在这两种动物精巢中的分布，以探讨这三种类固醇激素及其受体与精子发生的关系；还观察了原癌基因c-fos和c-myc在这两种两栖动物精巢中的表达，以研究其在精子发生过程中的作用。实验分析得到的结论如下： 1．山溪鲵的精子发生从每年的8月开始，此时精原细胞开始增殖，到冬季停止或减慢，然后到次年3、4月份又进入增殖高峰。6-7月为精母细胞成熟分裂时期，8-11月为精子形成期，成熟精子一直贮存在精巢内，直到第三年的3-4月份再排出。因此，从精原细胞增殖到精子完全排出共经历20-21个月。在此期间，成熟精子贮存在精巢小叶末端的管腔内或在输精管内越冬，贮存期为7-9个月。 2．隆肛蛙精子发生的个体差异较明显，就个体而言，从精原细胞开始增殖到精子完全变态所需的时间很短，但就种群而言，其精子发生过程所需的时间持续较长。其精子发生从每年的6、7月份开始，8、9月份变成成熟精子。成熟精子贮存在精巢内越冬，直到第二年的4、5月份排出。精子发生从精原细胞增殖到成熟精子排出共经历11-12个月。精原细胞的增殖是否从11月份就开始还有待探讨。隆肛蛙因对寒冷的气候很敏感，在外界活动的时间短，使其从精原细胞到成熟精子发育的时间很短，精原细胞很快增殖并进行成熟分裂而成为成熟精子。 3.山溪鲵精巢中的间质细胞在每年的4-5月和9-10月可能产生T，但精原细胞的增殖并不依赖于T，T可能与生殖行为的发生和精子的形成密切相关。隆肛蛙秋季精巢的支持细胞中大量的T可能通过旁分泌作用参与精子的充分成熟。T通过雄激素受体的介导，以基因组效应方式起作用。间质细胞中的AR可能在原位介导T发生作用，通过负反馈方式抑制间质细胞产生类固醇激素。 4.E2以基因组效应方式起作用，它可直接作用于生精细胞启动精子的发生。在两栖动物，E2可能也通过支持细胞对间质细胞的功能进行负反馈调节，进而影响T的产生。E2和ER也可能参与精子细胞的变态和精子成熟的调节。 5.P和PR通过基因组效应可能在精子的发育过程中起作用。P和PR与精子的发生和成熟密切相关，P可能参与支持细胞与精子之间的信息传递，也可能直接参与精子的成熟调节。 6.c-fos产物从精原细胞胞质中转移到胞核中后通过启动DNA的转录而调控精原细胞的增殖，从而促进精子发生的进程。c-fos产物还可能直接作用于间质细胞调控其产生类固醇激素，并参与支持细胞与生精细胞的信息传递。T的含量与c-fos的表达也有直接关系。 7.随着精子发育时期的不同，c-myc产物在山溪鲵精巢中有从生殖细胞的胞质向胞核中转移的趋势。c-myc也是作为核转录因子通过诱导DNA的转录而调控精子的发育过程。