题目：红景天苷对肌管萎缩的抑制作用及细胞学机制

近年来，随着人类对航天事业的不断探索，人类在航天事业中取得了卓越的成绩，人类也越来越频繁地走进太空。在航天飞行尤其在中长期航天飞行过程中，微重力将导致肌萎缩，从而严重影响航天员完成飞行任务和返回地面后的健康恢复。但遗憾的是，即便是采取了高强度的物理对抗措施，仍不足以对抗失重性肌萎缩的发生。因此为了能有力保证我国航天工作的进一步发展及航天员的身体健康，我们有必要继续探索寻找除物理对抗以外的其它对抗方式。骨骼肌在机体维持稳态方面有着显著的作用，骨骼肌是人体中比重最大的器官占到总体重的40%。对于外界环境的刺激骨骼肌能很好的适应，是应为骨骼肌自身的再生能力，内分泌能力以及免疫能力都很发达。红景天广泛用于高原、高寒等特殊环境中的工作人员，以提高机体对恶劣环境的适应能力，故称为“适应原”药材。红景天苷是从红景天中提取的有效活性物质，具有抗缺氧，抗疲劳，抗应激，增强免疫力等多种药理作用。但尚未见在骨骼肌中作用的研究报道。
在本实验研究中，我们以SD大鼠中分离培养的C2C12成肌细胞做为研究对象，在C2C12成肌细胞分化后期，诱导形成肌管后，采用PBS饥饿法培养诱导C2C12成肌细胞的肌管萎缩，最终诱导建立C2C12细胞的肌萎缩模型。研究红景天苷对体外肌管萎缩的影响，利用分子生物学的检测手段,检测了肌萎缩相关基因Atrogin1和MuRF1的表达,说明红景天苷对体外肌管萎缩后，相关萎缩基因表达的影响，通过real time PCR的方法检测了与细胞增殖有关的基因Myf5的表达,研究红景天苷对C2C12成肌细胞增殖能力的影响，探讨红景天苷影响肌管萎缩的细胞学机制。采用Western blot的方法，动态检测了C2C12细胞诱导萎缩阶段AMPK，smad3 及其磷酸化水平的表达变化.探讨AMPK，Smad3的表达是否参与了C2C12成肌细胞肌萎缩的形成。结果表明：
1、C2C12成肌细胞体外诱导分化3天后形成肌管，应用PBS处理6小时后，光镜下可观察到肌管明显变细；real time PCR可检测到萎缩相关基因（Atrogin1和MuRF1）表达显著增加，证实我们成功建立了体外肌管萎缩模型；
2、将C2C12成肌细胞分为对照组和红景天苷处理组，体外诱导肌管萎缩，两组肌管均明显萎缩，但红景天苷处理组肌管直径明显较对照组增加，说明红景天苷可部分抑制体外诱导的肌管萎缩；real time PCR结果表明，红景天苷有效抑制了萎缩相关基因（Atrogin1和MuRF1）的表达，进一步证实了红景天苷对肌管萎缩的对抗作用；
3、红景天苷处理后可显著增加肌管萎缩过程中处于增殖阶段的C2C12细胞数目，并明显诱导了C2C12细胞增殖相关基因Myf5的表达，提示红景天苷对抗肌管萎缩的作用可能与促进了成肌细胞的增殖有关。
4、红景天苷处理后可显著降低肌管萎缩过程中AMPK和其磷酸化水平的表达量，由于激活AMPK可抑制C2C12细胞增殖，提示红景天苷对抗肌管萎缩的作用可能是通过降低AMPK的表达量，最终促进成肌细胞的增殖相关。
因此，本研究揭示了红景天苷对体外诱导的肌管萎缩具有明显的抑制作用，并且可能与促进了C2C12细胞的增殖有关，同时还研究了红景天苷抑制机关萎缩的分子机制。本实验有望为今后对抗失重性肌肉萎缩提供一定的实验依据。
关键词：红景天苷，肌管萎缩，C2C12细胞，细胞增殖