2017年浙江大学医学院830生物化学与分子生物学之现代分子生物学考研仿真模拟题
● 摘要
一、名词解释
1． 拓扑异构酶（topoisomerase ）
【答案】拓扑异构酶是指能在闭环DNA 分子中改变两条链的环绕次数的酶，其作用机制是先切断DNA ，让DNA 绕过断裂点以后再封闭形成双螺旋或超螺旋DNA 。
2． DNA Fingerprint
DNA 指纹是指由于限制性酶切位点的改变或DNA 序列中重复序列等原【答案】DNA 指纹。
因，以及一些DNA 遗传标记的差异性，生物个体DNA 表现的个体间的差异，这些个体差异反映了个体的身份。利用DNA 指纹鉴定个体差异的技术为DNA fingerprinting，用于亲子鉴定。
3． 同源重组（homologous recombination）
【答案】同源重组是指发生在DNA 的同源序列之间的重组，真核生物的非姐妹染色单体的交换，细菌的转化、转导和接合，噬菌体的重组等都属于这种类型。同源重组要求较大的DNA 片段进行交换它们的序列相同或接近相同。
4． 转录后加工（post-transcription processing）
【答案】转录后加工是指新合成的较大的前体RNA 分子，经过进一步的加工修饰，转变为具有生物学活性的、成熟的RNA 分子的过程，主要包括剪接、剪切和化学修饰。
5． YAC
【答案】酵母人工染色体。酵母人工染色体是指一种能够克隆长达400Kb 的DNA 片段的载体，含有酵母细胞中 必需的端粒、着丝点和复制起始序列，可用于基因组大片段库构建。
6． 反式剪切（Trans-splicing ）
【答案】反式剪切是指一种保守的mRNA 加工机制，已经在包括原生动物和多细胞动物等多种生物体中发现。SL 反式剪切是反式剪切的一种，是将一段相对保守的剪切引导序列（SL ）加到
前体mRNA 的5' 端作为一个外显子，从而提高成熟mRNA 的稳定性，并且可能参与翻译的起始。
7． 核酸分子杂交（hybridization ）
【答案】核酸分子杂交是指应用核酸分子的变性和复性的性质，使来源不同的DNA （或RNA ）片段，按碱基互 补关系形成杂交双链分子的一项实验技术，杂交双链可以在DNA 与DNA 链之间，也可在RNA 与DNA 链之间 形成。
8． 阻遏蛋白
【答案】阻遏蛋白是指一类在转录水平对基因表达产生负控作用的蛋白质，在一定条件下与DNA 结合，一般具有诱导和阻遏两种类型。
9． Attenuator
【答案】弱化子。弱化子是指当操纵子被阻遏时，RNA 合成终止，起终止转录信号作用的核苷酸序列。弱化子 对于基因活性的影响是通过影响前导序列mRNA 的结构而发挥作用的，其调节作用的是某种对应氨酰-tRNA 的浓度，典型例子是细菌中的色氨酸操纵子。
10．单核哲酸多态性（single nucleotide polymorphism, SNP）
【答案】单核苷酸多态性是指在基因组水平上由单个核苷酸的变异所引起的DNA 序列多态性。它是人类可遗传的变异中最常见的一种，占所有已知多态性的90%以上。SNP 所表现的多态性只涉及单个碱基的变异，这种变异一般由单个碱基的转换或颠换引起。
11． 【答案】，是指一种利用非放射即荧光原位杂交技术（fluorescence in situ hybridization）
性的劳光信号对原位杂交样本进行检测的技术。它将荧光信号的高灵敏度、安全性，荧光信号的直观性和原位杂交的高准确性结合
起来，通过荧光标记的DNA 探针与待测样本的DNA 进行原位杂交，在荧光显微镜下对荧光信号进行辨别和计数，从而对染色体或基因异常的细胞、组织样本进行检测和诊断，为各种基因相关疾病的分型、预前和预后提供准确的依据。
12．顺式作用元件
【答案】顺式作用元件是指与结构基因表达调控相关、能够被基因调控蛋白特异性识别并结合的特异DNA 序列，包括启动子、上游启动子元件、增强子、沉默子等。
二、简答题
13．人类为防治
为什么做了大量的工作，但是用高的变异速度以逃避人体的免疫系统和药物，的变异如此之快？的变异有无规律？主要在哪些方面发生变异？
【答案】（1） HIV 发生变异的原因
①HIV 的逆转录酶没有校对功能，错误引入的核苷酸不能被及时切除，导致复制错误而产生变异，在 强大的复制能力下，错误不断发生而产生大量的病毒变种；
②由于宿主的免疫选择作用，体液或细胞免疫的基因组变异高于其他部位；
③病毒DNA 与宿主DNA 之间或不同病毒DNA 之间的重组也会导致病毒变异。
（2）
（3）的变异没有特定的规律，不同
编码区。
基因区变异率有显著的差别。 的变异主要是产生了较高频率的点突变，通常发生在编码病毒核心蛋白的gag 编码区和编码外壳蛋白的
14．蛋白质实验原理与主要步骤。
【答案】（1）实验原理
利用与GST 融合蛋白质探针蛋白质亲和结合，从可溶性蛋白质库中纯化一个未知蛋白质，再
通过GST 与谷 胱甘肽偶联的琼脂糖球珠的结合收集相互作用蛋白质，从而分离出蛋白质复合物。
（2）主要步骤
① GST 融合蛋白先与下列蛋白溶液之一孵育（a. 单一明确的重组蛋白；b. 细胞裂解蛋白混合
； 液；c. 体外 翻译cDNA 表达得到的未知蛋白）
②混合液与谷胱甘肽琼脂糖球珠在4°C 反应2h ，离心得沉淀；
③沉淀加入2 X蛋白Loading Buffer煮沸，离心，取上清进行SDS-PAGE 电泳；
④考马氏亮兰对SDS-PAGE 胶进行染色，观察特异沉降的蛋白带，接着进行质谱分析确定沉降的蛋白；
⑤电泳后的胶做Western Blot来确定沉降的蛋白中是否有目的蛋白。
15．通过对本章的学习，科学家的哪些品质最使你受到感动?
【答案】科学家们对于生命科学执着的追求最令人感动。正如华罗庚所说:“科学成就就是由一点一滴积累起来的，惟有长时期的积聚才能由点滴汇成大海。”每个生命本质问题的重大突破都不是在一朝一夕间完成的，是科学家们坚持不懈的努力，在漫长的岁月中，前赴后继地去探索、去思考、去实践、去论证，反反复复又不断提出新的思路，才有了今天繁荣的生命科学。如从提出，到发现，冉到证实遗传物质是DNA 的过程，前后经过了许多科学家不断提出质疑，然后反复试验、论证，最后才得出结论，为基因学奠定了基础。我们在科研的过程中，也应该学习这些科学家们坚持不懈的精神。
（也可从科学家严谨的科学态度、善于发现的创新精神等方面作答。）
16．如果一个基因与肿瘤的发生有关，如果设计实验以判断该基因是癌基因还是肿瘤抑制基因？
【答案】（1）检测该基因所表达蛋白在肿瘤组织中和正常细胞中的表达量。如果和正常组织相比，在癌细胞中该蛋白表达量很低甚至没有，该基因很可能是肿瘤抑制基因；如果先比之下癌组织中该蛋白高表达，则该基因是癌基因。
（2）进一步实验：敲除该基因在正常细胞系中的表达或抑制该基因表达，观察细胞转化的效果，与肿瘤组织进行比较分析。如果该基因被抑制以后，细胞分裂性增强，可初步确定该基因为肿瘤抑制基因；若减弱分裂则确定是癌基因。
17．DNA 复制时为什么前导链是连续复制，而后随链是以不连续的方式复制? 并请以大肠杆菌为例简述后随链复制的各个步骤。
【答案】（1）前导链是连续复制，而后随链是以不连续的方式复制的原因:
①DNA 的合成方向是5' →3' ，DNA 聚合酶只有5' →3' 聚合酶活性，而没有3' →5' 聚合酶活性。
②复制叉附近解开的DNA 链一条是5' →3' 方向，另一条是3' →5' 方向，两者分别是后随链和