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一、名词解释

1． 的二面角。

【答案】多肽链中，用. 表示；绕Ca-C 键轴旋转的角度常用表示，它们被称为单位的相对位置。

2． 糖原分解。

【答案】糖原分解是指糖原分解成葡萄糖或葡萄糖-1-磷酸的过程。

3． 氨基酸的活化。

【答案】在过程，

4． 酶工程。 参与下由氨酰是氨基酸的活化形式。 合成酶催化氨基酸与相应tRNA 形成氨酰的的二面角。的二面角决定了由连接的两个肽和都是单键，可以自由旋转。其中，绕键轴旋转的角度常

【答案】酶工程是指在一定生物反应装置中利用酶的催化性质，将相应原料转化成有用物质的技术，是酶学和工程学相互渗透结合、发展而成的一门新的技术科学，是酶学、微生物学的基本原理与化学工程有机结合而产生的边缘科学技术。包括化学酶工程和生物酶工程。

5． 尿素-梓檬酸双循环（krebsbicycle ）。

【答案】尿素-柠檬酸双循环是尿素循环和柠檬酸循环密切联系在一起的循环途径。在尿素循环中生成的延胡索酸，使尿素循环和柠檬酸循环密切联系在一起。精氨玻珀酸裂解生成的延胡索酸可转变为苹果酸，苹果酸进一步氧化生成草酰乙酸，草酰乙酸既可进入柠檬酸循环，也可经转氨作用再次形成天冬氨酸进入尿素循环。

6． R 酶。

【答案】R 酶作用于α-及β-淀粉酶作用后剩下的极限糊精，分解α（1→6）糖苷键的酶。

7． 蛋白质的腐败作用

用。

【答案】蛋白质的腐败作用是指肠道细菌对部分未消化的蛋白质及部分消化产物所发生的作

8． 卫星DNA （satdliteDNA ）。

【答案】是指真核细胞染色体DNA 经氯化铯密度梯度离心，其高度重复序列因组成不同而在主带旁自成一条或数条条带

二、问答题

9． 胰岛素分子中包含A 、B 两条肽链，是否代表胰岛素含有两个不同型的亚基？为什么？

【答案】胰岛素分子中虽然包含A 、B 两条肽链，但这并不代表胰岛素含有两个不同型的亚基。因为亚基最重要的特征是其本身具有特定的空间构象，而胰岛素的单独的A 链或B 链都不具有特定的空间构象，所以胰岛素分子中的A 链和B 链并不代表两个亚基。

10．试述非离子型去垢剂增溶膜蛋白的机制。

【答案】非离子型去垢剂为两亲性分子，当它们与膜蛋白作用时，可以用非极性端与膜蛋白的疏水区作用，取代膜脂，极性端指向水中，使蛋白质成为水溶性，从而与膜分离。

11．比较DNA 与RNA —级结构的异同点。

【答案】核酸的一级结构也就是核酸的共价结构，通常是指核酸的核苷酸序列。DNA 的一级结构是指DNA 分子中脱氧核苷酸的排列顺序及连接方式，核苷酸的排列顺序代表了遗传信息。RNA 的一级结构是指核糖核苷酸的数量和排列顺序。

不同点：DNA 的一级结构中组成成分为脱氧核糖核苷酸，核苷酸残基的数目由几千到几千万个；而RNA 的组成成分为核糖核苷酸，核苷酸残基的数目仅有几十到几千个。另外，在DNA 分子中A=T，G=C; 而在RNA 分子中

相连接的。

12．目的DNA 片段的获得主要有哪几种方法？

【答案】获得DNA 片段的主要方法有：（1）化学法直接合成基因；（2）从基因组文库中获取目的基因；（3） 从cDNA 文库中获取目的基因；（4）通过PCR 直接扩增出目的基因。

13．甲硫氨酸的密码子AUG 既是起始密码子，又是肽链内部甲硫氨酸残基的密码子。什么样的因素能保证在翻译过程中不出现差错？

【答案】硫氨酸的单一的密码子有两种tRNA 去识别，即密码子

甲酰化生成甲酰

但有不同的专一性，当甲硫氨酸与即

和它们有相同的反

后，可进一步

上发

序列（简称SD 相同点：它们都是以单核苷酸作为基本组成单位，核苷酸残基之间都是由3’，5’-酸二酯键反应生成这种甲酰化反应不会在甲硫氨酸或有一段富含嘌呤的

的生。因为在mRNA

起始密码子的上游区序列），它能与核糖体30S 小亚基正确定位在mRNA 的SD 序列允许端一段富含嘧啶的序列互补结合，使30S 小亚基正确结合在30S 小亚基P 位的起始密码子

上。此外，无论是甲酰化或非甲酰化的都不能与和GTP 形成复合物，也保证了只有能够进入核糖体的A 位，使甲硫氨酸能掺入肽链的内部。

14．简述核酸分离纯化的原则和大致步骤。

【答案】（1）核酸分离纯化最重要的原则有两个：①保持核酸分子一级结构的完整性；②防止核酸分子的生物降解。

（2）核酸分离的大致步骤是：①破碎细胞；②有机溶剂（如苯酚、酚氯仿、异戊醇以及SDS ）变性蛋白，反复抽提，获得核酸制品；③密度梯度离心进一步分离不同构象的核酸；④柱层析分离变性核酸与天然核酸。

此外，还有一些特殊方法用于提纯特定的核酸。例如，可以用亲和层析和免疫法分离纯化，用纯的RNase 处理除去DNA 中混杂的少量RNA 。

15．某些蛋白质激酶只有在其活性中心的Ser 或Thr 磷酸化才有活性。有人使用定点突变的技术将上述激酶相应的Ser 或Thr 突变成Glu 后，发现也有活性了，请你给出合理的解释。如果人类细胞发生这样的突变，会有什么样的后果，为什么？

Ser 或Thr 因为磷酸化导致其构象发生变化而被激活，【答案】构象变化的根本原因是磷酸基

团带有负电荷，如果Ser 或Thr 突变成Glu , 因为Glu 的侧链基团也带负电荷，而且其大小与磷酸化的Ser 差不多，故也可能引起类似的构象变化，而导致酶被激活。

这种激活将会是组成型激活，因为它不像磷酸化的Ser 或Thr , 可以被磷酸酶水解掉带负电荷的磷酸基团，所以后果将会一直导致细胞内它作用的靶蛋白的磷酸化，从而使细胞功能紊乱，甚至导致细胞癌变或死亡。

16．如何让一个超螺旋的环状病毒DNA 分子处于松弛态? 线形双链DNA 能否形成超螺旋？

【答案】内切核酸酶作用于超螺旋的环状病毒DNA 分子，在其中的一条链上产生“缺刻”（nick ）, 释放张力，则超螺旋转变为松弛态，线形DNA 分子只有当两端都被固定时，才能产生超螺旋。

三、论述题

17．请写出三种测定蛋白质含量的方法名称，并进一步写出其中一种的测定原理。

【答案】蛋白质含量的测定方法：双缩脲法、凯氏定氮法、Folin-酚法、紫外吸收法、胶体金结合法、考马斯亮蓝法。

（1） Folin-酌法（Lowry 法）：Lowry 法是双缩脲法的发展，在碱性条件下，蛋白质中的肽

Folin-酚试剂中的磷钼酸盐一磷钨酸盐被蛋白质中的酪氨酸和苯丙氨酸残键与铜结合生成复合物。

基还原，产生深蓝色（钼兰和 钨兰的混合物）。在一定的条件下，蓝色深度与蛋白质含量成正比。

（2）考马斯亮蓝染色法：考马斯亮蓝G250能与蛋白质的疏水微区相结合。考马斯亮蓝G250的磷酸溶液呈 棕红色，最大吸收峰在465 mn，当它与蛋白质结合后形成的蛋白质-染料复合物有