2018年广州中医药大学实验动物中心306西医综合之生物化学考研核心题库
● 摘要
一、名词解释
1.
【答案】 (半胱谷氨酰胺)是由谷氨酸的Y-羧基与半胱氨酸的a-氨基缩合而成,这与蛋白质分子中的肽键不同。
2. 拓扑异构酶(topoisomerase )。
【答案】拓扑异构酶是指通过切断DNA 的一条或两条链中的磷酸二酯键,然后重新缠绕和封口来改变DNA 连环数的酶。拓扑异构酶I 通过切断DNA 中的一条链减少负超螺旋,增加一个连环数。某些拓扑异构酶II 也称为DNA 促旋酶。
3. 底物。
【答案】某一酶的底物是指被该酶作用的物质。
4. 高脂蛋白血症。
【答案】高脂蛋白血症是一种由于血中脂蛋白合成与清除混乱引起的疾病。血浆脂蛋白代谢
异常可包括参与脂蛋白代谢的关键酶,载脂蛋白或脂蛋白受体遗传缺陷,也可以由其他原因引起。
5. 终止密码子。
【答案】终止密码子是指任何tRNA 分子都不能正常识别的,但可被特殊的蛋白结合并引起新合成的肽链从翻译 机器上释放的密码子。存在3个终止密码子:UAG ,UAA 和UGA 。
6. 嘧啶核苷酸的从头合成途径(de novo pyridine nucleotide synthesis)。
【答案】嘧啶核苷酸的从头合成途径是以谷氨酰胺、天冬氨酸、
成嘧啶核苷酸,是嘧啶核苷酸合成的主要方式。
7. 生物固氮。
【答案】生物固氮是指微生物、藻类和与高等植物共生的微生物通过自身的固氮酶复合物把分子氮变成氨的过程。
8. 稀有械基。
【答案】稀有碱基,又称修饰碱基,这些碱基在核酸分子中含量比较少,但它们是天然存在不是人工合成的,是核酸合成后,进一步加工而成。修饰碱基一般是在原有碱基的基础上,经甲基化、乙酰化、氢化、氟化以及硫化而成。如
:
甲基胞苷
第 2 页,共 32 页 小分子为原料,从头合双氢脲苷(D ),硫
化尿苷等。另外有一种比较特殊的核苷:假尿嘧啶核苷是由于碱基与核糖连接的方式与众不同,即尿嘧啶5位碳与核苷形成的
糖苷键。tRNA 中含修饰碱基比较多。
二、问答题
9. 有时知道一个基因的DNA 序列并不能得知其编码的蛋白质的氨基酸序列,请说明原因。
【答案】DNA 经常在基因内部有内含子,因此DNA 序列推测出的最终蛋白序列有可能是错误的。而且蛋白质在翻译后还会进行修饰,因此蛋白质序列上可能有被修饰的地方并没有体现在DNA 序列中。
10.计算一分子丙氨酸脱氨后彻底氧化形成ATP 的分子数。
【答案】丙氨酸脱氨形成丙酮酸,丙酮酸氧化脱羧产生1分子
分子在三羧酸循环中,有4次脱氢,其中3次产生
再加上由琥珀
酰生成7.5分子成1.5分
子通过呼吸链可生成2.51次产生生所以共产
生生成琥珀酸产生1分
子
分子。所以1分子丙氨酸脱氨后彻底氧化形成
11.外源基因导入动物细胞有哪些常用方法?
【答案】常用的方法有:(1)磷酸钙共沉淀法,用分子数为12.5。 沉淀磷酸离子和DNA , 沉积在细胞质膜上的DNA 被细胞吸收,可能是通过吞嗤作用;(2) DEAD 葡聚糖(DE-AE-dextron )或聚阳离子(polycation )法,它能结合DNA 并促使细胞吸收;(3)脂质体(liposome )法,利用类脂经超声波、机械搅拌等处理,形成双脂层小囊泡, 将DNA 溶液包裹在内,它通过与细胞质膜融合而使DNA 进入细胞;(4)脂质转染法,用人工合成的阳离子类 脂与DNA 形成复合性,借助类脂穿过质膜而将DNA 导入细胞内;(5)电穿孔法,在脉冲高压电场作用下质膜 瞬间被击穿,DNA 得以进入细胞,细胞膜随即修复正常;(6)显微注射法,对哺乳动物受精卵等较大的细胞,导入外源DNA 可以用显微注射法,即在显微镜下,用极细的玻璃注射器针头
枪射击动物的表皮、肌肉和 乳房等获得成功的例子也有报道。
在以上诸方法中,磷酸钙共沉淀法成本低、操作方便,但效率低;脂质转染法和电穿孑1法,前者需要昂贵的试剂,后者需要特殊的仪器,但效率高,现在较常用。显微注射法效率极高,还可直接将DNA 送入核内,但 需要昂贵仪器,且技术复杂不易掌握。
12.什么是拓扑异构酶?它们怎样参与DNA 的复制过程?
【答案】(1)拓扑异构酶(topoisomerase )是指通过切断DNA 的一条或两条链中的磷酸二酯键,然后重新缠绕和封口来改变DNA 连环数的酶。
(2)生物体内DNA 分子通常处于超螺旋状态,而DNA 的许多生物功能需要解开双链才能进行。拓扑异构酶就是催化DNA 的拓扑连环数发生变化的酶,它可分为拓扑异构酶和拓扑异构酶型酶可使双链DNA 分子中的一条链发生断裂和再连接,反应不需要提供能量,它们主要
第 3 页,共 32 页 插入细胞内并注入DNA 溶液;(7)基因枪(genegun )法,在动物转基因中使用相对较少,用基因
集中在活性转录区,同转录有关。型酶能使DNA 两条链同时发生断裂和再连接,当它引入负超螺旋时需要由ATP 提供能量。它们主要分布在染色质骨架 蛋白和核基质部位,同复制有关。拓扑异构酶可减少负超螺旋;拓扑异构酶可引入负超螺旋,它们协同作用控制着DNA 的拓扑结构。拓扑异构酶在重组、修复和DNA 的其他转变方面起着重要的作用。
13.有一种酶E 作用底物S 产生产物P 。化合物C 是这一种酶的别构激活剂。使用定点突变技术将酶E 的Val57突变成其他集中氨基酸残基。将野生型和突变体纯化以后,分别在有C 和无C 的条件下测定酶活性,活性分析的结果见表:
表
(1)根据突变体的数据,你认为Val57位于别构中心还是活性中心?
(2)根据氨基酸的性质,解释突变如何影响到酶E 的活性?
【答案】(1)突变对酶的基础活性(无C 时)没有影响,说明Val57不是酶活性中心的一部分或者与别构中心有关。相反,在有C 时,Val57的突变对酶活性影响很大,这说明Val57的取代影响激活剂C 与别构中心的结合,进而影响到活性中心的构象和活性。
(2)Val 和Ala 都是疏水氨基酸,不带电荷,因此
的功能影响不大。但Ser 和Glu 都是极性氨基酸,所以属于保守性突变,对别构中心或突变都能影响到C 的结合,降低C 的激活效果,但与Ser 不同的是,Glu 既是极性氨基酸,又带电荷,故影响的效果更大。
14.—基因的编码序列中发生了一个碱基的突变,那么这个基因的表达产物在结构、功能上可能发生哪些改变?
【答案】(1)基因的编码产物中可能有一氨基酸发生改变,突变成另外一种氨基酸;(2)由于遗传密码的简并性, 虽然碱基改变,但基因的编码产物可能不变;(3)基因的编码产物可能变短,即突变成终止密码子而终止翻译。
15.简述膜内外物质是怎样跨膜出入细胞的。
【答案】膜内外物质(分子或离子)顺浓度梯度从高浓度到低浓度转运出细胞,不需要由胞
内水解来供能,这种转运过程称被动运输。被动运输又分三种形式扩散:
(1)简单扩散,物质通过质膜脂双层和质膜小孔进行通透,水和水溶性小分子及易溶于脂的非极性小分子可自由扩散。
(2)易化扩散,非脂溶性或亲水性分子,如氨基酸、糖和金属离子等借助质膜上内在的载体蛋白的协助,顺浓度梯度或电化学浓度运输入细胞,载体蛋白分为分子和离子两种载体,如分子
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