2018年第三军医大学药物分析学617西医综合之生物化学考研核心题库
● 摘要
一、名词解释
1． 单纯脱羧和氧化脱羧。
【答案】
生物氧化过程中生成的并不是代谢物上的碳原子与吸入的氧直接化合的结果，
而是有机酸脱羧作用生成的。根据脱羧反应的同时是否伴有氧化反应，分为单纯脱羧和氧化脱羧。
2． 拓扑异构酶（topoisomerase ）。
【答案】拓扑异构酶是指通过切断DNA 的一条或两条链中的磷酸二酯键，然后重新缠绕和封口来改变DNA 连环数的酶。拓扑异构酶I 通过切断DNA 中的一条链减少负超螺旋，增加一个连环数。某些拓扑异构酶II 也称为DNA 促旋酶。
3． 酶的必需基团。
【答案】酶的必需基团是指与酶活性有关的基团。酶的分子中存在着许多功能基团，
例如
等，但并不是这些基团都与酶活性有关。
4． 嘌呤核苦酸循环（purine nucleotide cycle）
【答案】嘌呤核苷酸循环是指骨骼肌中存在的一种氨基酸脱氨基作用方式。转氨基作用中生成的天冬氨酸与次黄嘌呤核苷酸（IMP ）作用生成腺苷酸代玻珀酸，后者在裂解酶作用下生成延胡索酸和腺嘌呤核苷酸，腺嘌呤核苷酸在腺苷酸脱氨酶作用下脱掉氨基又生成IMP 的过程。原因是骨骼肌中L-谷氨酸脱氢酶活性低的缘故。
5． 终止子
【答案】终止子
6． 谷胱甘肽。
【答案】谷胱甘肽是存在于动植物和微生物肽键，由谷氨酸的竣基与半胱氨酸的氨基缩合而成。显然这与蛋白质分子中的肽键不同。由于GSH 中含有一个活泼的疏基，很容易氧化，二分子GSH 脱氢以二硫键相连形成 氧化型的谷胱甘肽（GSSG ）。
7． 抗毒素。
【答案】抗毒素是一类对毒素具有中和作用的特异性抗体。能中和相应外毒素的毒性作用，机体经产生外毒素而致病的病原菌感染后即能产生抗毒素。外毒素经甲醛处理后，可丧失毒性而保持免疫原性成为类毒素，应用类毒素进行免疫预防接种，使机体产生相应的抗毒素可以预防疾
第 2 页，共 32 页 是分子中终止转录的核苷酸序列。
病。
8． 酶活性的可逆磷酸化调节。
【答案】酶活性的可逆磷酸化调节是指通过蛋白激酶催化的将ATP 或CTP 的位磷酸基转移到
底物蛋白质氨基酸残基上以及在蛋白磷酸化酶催化下的逆过程，从而使酶蛋白在活性状态与非活性状态之间互变，来调节酶的活性
二、问答题
9． 试述磺胺类药物抗菌的作用原理。
【答案】磺胺类药物与叶酸的组成成分对氨基苯甲酸的化学结构类似。因此磺胺类药物可以与对氨基苯甲酸竞争细菌体内的二氢叶酸还原酶，从而竞争性地抑制该酶的活性，使对于磺胺类药物敏感的细菌很难利用对氨基苯甲酸合成细菌生长所必需的二氢叶酸，最终抑制了细菌的生长、繁殖。人体所必需的叶酸是从食物中获得的，人体不能合成叶酸，故人体服用磺胺类药物只是影响了对磺胺类药物敏感的细菌的生长、繁殖，达到治病的目的。现在常见的增效磺胺类药物还附加了一些二氢叶酸还原酶的抑制剂，使细菌体内的四氢叶酸含量几乎为零，从而増加治疗效果。
10．有哪些酶参加蛋白质水解反应？总结这些酶的作用特点。
【答案】按照酶蛋白的活性部位的结构特征可将蛋白酶分为4类：
（1）丝氨酸蛋白酶类，活性部位含有Ser 残基，受二苯基氟磷酸（DIFP ）的强烈抑制。包括胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶、弹性蛋白酶、枯草杆菌蛋白酶等。
（2）半胱氨酸蛋白酶类，活性部位含有Cys 残基，对于碘乙酸等抑制剂十分敏感。大多数植物蛋白酶和组织蛋白酶属于此类酶。
（3）天冬氨酸蛋白酶类，活性中心含有两个Asp 残基，最适pH —般为
可专一地抑制这类酸性蛋白酶。如胃蛋白酶、凝乳酶等。
（4）金属蛋白酶类，含有等金属离子，受EDTA 等螯合剂的抑制。如嗜热菌蛋白酶、信号肽酶以及氨肽酶、羧肽酶等。
11．丙二酸是琥珀酸脱氢酶的竞争性抑制剂，试分析加入草酰乙酸为什么能解除该抑制作用？
【答案】竞争性抑制（如本例中的琥珀酸）可经由增加底物浓度而解除，草酰乙酸（或该循环中的其他中间代谢物）可通过梓檬酸循环转化为琥珀酸，故可解除丙二酸对琥珀酸脱氢酶的抑制作用。
12．一个正常的喂得很好的动物用
是相同还是不同？为什么？
（2）利用结构式指出甘油三酯中哪些碳原子被大量标记？
第 3 页，共 32 页 抑胃肽（pepstatin ）标记甲基的乙酸静脉注射，几小时后动物死了，从肝脏中分离出糖原和甘油三酯，测定其放射性的分布。（1）预期分离得到的糖原和甘油三酯放射性的水平
【答案】（1）动物不能净转变乙酸成糖，但能直接将乙酸转变成脂肪酸，后者将掺入到甘油三酯的合成中，因此酯类比糖类标记得多。虽然从乙酸不能净合成糖，但
一些乙酸将进入三羧酸循环，并将将在糖中出现，因为提供给葡萄糖异生作用的前体库。
（2）在甘油三酯中，标记主要出现在脂酰链的间隔的位置上，如下式所示：
13．假定你决定从一种新的生物Streptococcus bartelium体内纯化核糖核酸酶，你选择盐析作为纯化的第一步，随着你JJnA 硫酸铵到细胞裂解物之中，进行分级分离。如果你添加的盐浓度是0.5mol/L、lmol/L、1.5mol/L、2mol/L、和2.5mol/L，你如何确定你要的蛋白质在哪一级分离沉淀之中？
如果你选择离子交换层析作为纯化核糖核酸酶的第二步，同样需要确定哪一部分含有目标蛋白。你会使用哪一种离子交换树脂? 为什么? 你如何从交换树脂中洗脱下你的目标蛋白？
你将纯化的蛋白质走SDS-PAGE ，在考马斯亮蓝染色以后，你看到一条单一的
种蛋白质是一种核糖体蛋白，于是你决定再进行一次蛋白质染色，这一次你发现了一条
小的条带。这一次染色方法是什么？为什么
会多显示出新的条带，你如何分离这两种蛋白质？
【答案】（1）在纯化蛋白质过程中，首先需要建立一种测定活性的方法。测定核糖核酸酶活性的方法是利用其将RNA 降解成单个核苷酸的活性。使用放射性标记的NTP ，可转录出带放射性标记的RNA 。以此作为核糖核酸酶的底物，将其与含有酶的部分保温，然后用TCA 沉淀，再使用特定的滤膜过滤，通过测定流过滤膜的带有同位素标记的核苷酸的放射性，可测定出纯化物中酶活性的高低。
（2）既然核糖核酸酶的底物是磷酸核糖骨架带负电荷的RNA , 核糖核酸酶本身很可能带正电荷。因此，可考虑阳离子交换树脂来纯化核糖核酸酶。在低盐浓度下上柱，以吸附核糖核酸酶，然后用高盐缓冲液洗脱出核糖核酸酶。
（3）考马斯亮蓝染色的灵敏度仅能检测出含有大约lOOng 的条带，而银染的灵敏度达10ng 。所以使用考马斯亮蓝染色看不到的条带有可能通过银染看到。
为了将的核糖体蛋白与的核糖核酸酶分开，可使用凝胶过滤层析。的核糖核酸酶应该先流出来。
14．将新鲜制备的线粒体与羟丁酸、氧化型细胞色素c 、ADP 、Pi 和KCN 保温，然后测定丁酸的氧化速率和ATP 形成的速率。
（1）写出该系统的电子流动图。
（2）预期1分子羟丁酸该系统中氧化可产生多少分子A TP?
羟丁酸？
第 4 页，共 32 页 大小的大条带。为了确定它是不是核糖核酸酶，你决定将条带切下，然后测序。然而，你吃惊的发现，这羟（3）能否用NADH 代替
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