2018年河北医科大学眼科学306西医综合之生物化学考研基础五套测试题
● 摘要
一、名词解释
1． 肉毒碱穿梭系统（carnitine shuttle system）
【答案】肉毒碱穿梭系统是指长链脂酰CoA 通过与极性肉碱结合成脂酸一肉碱的形式从胞质中转运到线粒体内的循环穿梭系统，从而使活化的脂酸在线粒体内进一步氧化。
2． 同工 tRNA 。
【答案】同工tRNA 是指结合相同氨基酸的不同的tRNA 分子。
3． 两用代谢途径。
【答案】两用代谢途径是指既可用于代谢物分解，又可用于合成的代谢途径，往往是物质代谢间的枢纽。如三羧酸循环，既是糖脂蛋白质彻底氧化的最后途径，又可为糖、氨基酸的生物合成提供所需碳骨架和能量。
4． （己糖单磷酸途径）。
【答案】
（己糖单磷酸途径）即磷酸戊糖途径，是葡萄糖
和5-磷酸核
途径是细
分解代谢的一条旁路。6-磷酸葡萄糖酶促氧化分解，产生5-磷酸核酮糖、
胞产生还原力的主要途径， 酮糖经过一系列非氧化还原反应，重新转变为6-磷酸葡萄糖或其他糖酵解中间物。
为核酸代谢提供磷酸戊糖，同时是细胞内各种单糖互相转变的重要途径。
5． 自身激活作用（auto catalysis）。
【答案】自身激活作用是指消化蛋白质的酶是以酶原形式存在，有活性的蛋白酶可以激活酶原转变为有活性的酶。
6． 第二信使。
【答案】第二信使是指细胞外第一信使与其特异受体结合后，通过信息跨膜传递机制激活的受体，刺激膜内特定 的效应酶或离子道，而在胞浆内产生的信使物质。这种胞内信息分子起到将胞外信息传导、放大、变为细胞内信息的作用，包括环磷酸腺苷（cAMP ）、环磷酸鸟苷（cGMP ）、三磷酸肌醇（IP3）、二酰基甘油（DG ）等。
7． 顺式作用（cis-acting ）。
【答案】顺式作用是指位于DNA 上的序列组件只对其自身下游的序列起作用。
8． 自发突变（spontaneous mutation）。
【答案】自发突变是指由生物体内在因素引起的突变。
二、问答题
9． 假定你决定从一种新的生物Streptococcus bartelium体内纯化核糖核酸酶，你选择盐析作为纯化的第一步，随着你JJnA 硫酸铵到细胞裂解物之中，进行分级分离。如果你添加的盐浓度是0.5mol/L、lmol/L、1.5mol/L、2mol/L、和2.5mol/L，你如何确定你要的蛋白质在哪一级分离沉淀之中？
如果你选择离子交换层析作为纯化核糖核酸酶的第二步，同样需要确定哪一部分含有目标蛋白。你会使用哪一种离子交换树脂? 为什么? 你如何从交换树脂中洗脱下你的目标蛋白？
你将纯化的蛋白质走SDS-PAGE ，在考马斯亮蓝染色以后，你看到一条单一的
种蛋白质是一种核糖体蛋白，于是你决定再进行一次蛋白质染色，这一次你发现了一条
小的条带。这一次染色方法是什么？为什么
会多显示出新的条带，你如何分离这两种蛋白质？
【答案】（1）在纯化蛋白质过程中，首先需要建立一种测定活性的方法。测定核糖核酸酶活性的方法是利用其将RNA 降解成单个核苷酸的活性。使用放射性标记的NTP ，可转录出带放射性标记的RNA 。以此作为核糖核酸酶的底物，将其与含有酶的部分保温，然后用TCA 沉淀，再使用特定的滤膜过滤，通过测定流过滤膜的带有同位素标记的核苷酸的放射性，可测定出纯化物中酶活性的高低。
（2）既然核糖核酸酶的底物是磷酸核糖骨架带负电荷的RNA , 核糖核酸酶本身很可能带正电荷。因此，可考虑阳离子交换树脂来纯化核糖核酸酶。在低盐浓度下上柱，以吸附核糖核酸酶，然后用高盐缓冲液洗脱出核糖核酸酶。
（3）考马斯亮蓝染色的灵敏度仅能检测出含有大约lOOng 的条带，而银染的灵敏度达10ng 。所以使用考马斯亮蓝染色看不到的条带有可能通过银染看到。
为了将
的核糖体蛋白与的核糖核酸酶分开，
可使用凝胶过滤层析。的核糖核酸酶应该先流出来。
10．在经由柠檬酸循环途径被氧化之前，柠檬酸必须先异构化成异柠檬酸，为什么？
【答案】与异柠檬酸的二级醇羟基相比，柠檬酸的三级醇发生氧化反应要难得多，因而该异构化反应为其氧化脱羧提供了一条更容易的途径。
11．比较底物水平磷酸化、光合磷酸化与氧化磷酸化三者的异同。
【答案】（1）底物水平磷酸化是指底物氧化还原反应过程中，分子内部能量重新分布，使无机磷酸酯化，形成高能磷酸酯键，后者在酶的作用下将能量转给ADP ，生成A TP 。
（2）氧化磷酸化是指与生物氧化相偶联的磷酸化作用，发生在线粒体中，生物氧化过程中的
大小的大条带。为了确定它是不是核糖核酸酶，你决定将条带切下，然后测序。然而，你吃惊的发现，这
电子传递在线粒体内膜两侧产生了浓度差
，顺浓度差流动时推动了A TP 的生成，能量的最终来源是代谢过程中产生的还原型辅酶所含的化学能。
（3）光合磷酸化是指与光合作用相偶联的磷酸化作用，发生在叶绿体中，光照引起的电子传
递在叶绿体类囊体膜两侧产生了浓度差
，顺浓度差流动时推动了A TP 的生成，能量的最终来源是光能。
12．试比较氨基甲酰磷酸合成酶Ⅰ和Ⅱ的异同。
【答案】氨基甲酰磷酸合成酶I 和II 共同点是：
都是催化游离氨
不同点在于：
氨甲酰磷酸合与TCA
循环产生的存反应生成氨甲酰磷酸；都要消耗2分子A TP ; N-乙酰Glu
激活氨甲酰磷酸合存在于线粒体中，参与尿素的合成；
氨甲酰磷酸合
在于胞质中，参与尿嘧啶的合成。
13．大肠杆菌既可以通过光复活系统，也可以通过核苷酸切除修复系统来修复由紫外线照射产生的嘧啶二聚体，如何通过实验区分这两种机制？
【答案】切除修复需要将嘧啶二聚体切除掉，换上正常的胸苷酸，而光复活机制是通过光复
活酶直接破坏嘧啶二聚体的环丁烷环而修复嘧啶二聚体。因此可以用标记的胸苷追踪修复过程，如果出现在修复后的DNA 分子上，则修复的方式是切除修复，否则就是光复活机制。
14．一个双螺旋DNA 分子中有一条链的A%=24%, C%=30%。
（1）说明这一条链上的（T+G）的摩尔分数；
（2）互补链上的A , C ，（A+C）的摩尔分数。
【答案】（1）已知A%=24%。C%=30%
所以这条链上（T+G）%=1-（A%+C%）=46%
（2）根据Chargaff 规则，A%=T%，C%=G%
所以互补链上T%=24%，G%=30%，（A+C）%=46%
15．在很多酶的活性中心均有His 残基参与，请解释。
【答案】酶蛋白分子中组氨酸的侧链咪唑基pK
值为在生理条件下，一半解离，一半不解离，因此既可以作为质子供体（不解离部分），又可以作为质子受体（解离部分），既是酸，又是碱，可以作为广义酸碱共同催化反应，因此常参与构成酶的活性中心。
16．海藻糖是一种非还原性二糖，没有变旋现象，不能生成脎，也不能用溴水氧化成糖酸，用酸水解只生成葡萄糖，可以用-葡萄糖苷酶水解，但不能用
甲基
葡萄糖，
证明海藻糖由葡萄糖苷酶水解，甲基化后水解生葡萄糖组成。海藻糖是一种非还
糖苷键。甲基成两分子2, 3, 4, 6-四葡萄糖，试推测海藻糖的结构。 【答案】
用酸水解海藻糖只生成糖苷键相连。可用
葡萄糖苷原性二糖，没有变旋现象，不能生成脎，也不能用溴水氧化成糖酸，说明它的两个单糖基通过1, 1-
酶水解，
但不能用葡萄糖苷酶水解，
说明是
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