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一、名词解释

1． 乳酸循环。

【答案】乳酸循环是指指肌肉缺氧时产生大量乳酸。大部分经血液运到肝脏，通过糖异生作用，肝糖原或葡萄糖补充血糖，血糖可再被肌肉利用，这样形成的循环。

2． gene chip （基因芯片）。

【答案】genechip （基因芯片）又称DNA 芯片、生物芯片、DNAmicroarray （DNA 微阵列）等，是根据核酸分 子杂交建立的大规模定量或定性检测基因信息的实验技术，点样、杂交、图像处理和数据处理都利用计算机自动或半自动完成。

3． 盐析。

【答案】盐析是指在蛋白质溶液中加入大量中性盐而使蛋白质沉淀的现象。这是由于大量的盐离子可与蛋白质竞争溶液中的水分子，从而破坏蛋白质颗粒表面的水化层，失去水化层的裸露的蛋白质分子易于聚集而沉淀。

4． 次级胆汁酸

【答案】次级胆汁酸是指由初级胆汁酸在肠道内经细菌的作用下氧化生成的胆汁酸，包括脱氧胆酸和石胆酸以及其与甘氨酸和牛磺酸的结合产物。

5． 活性中心

【答案】活性中心是指酶分子上与底物结合并直接催化底物变成产物的区域，它是一种三维实体结构，呈裂缝、裂隙或口袋状。

6． 编辑

【答案】编辑是指在基因转录产生的

编辑。 分子中，由于核苷酸的缺失、插入或置换，基因转录物的序列不与基因编码序列互补，使翻译生成的蛋白质的氨基酸组成不同于基因序列中的编码信息，

这种现象称为

7． 同功蛋白质。

【答案】同功蛋白质是指不同种属来源的执行同种生物学功能的蛋白质。它们的分子组成基本相同，但有差异。同功蛋白质的氨基酸组成可区分为两部分：一部分是不变的氨基酸顺序，它决定蛋白质的空间结构与功能，各种同功蛋白质的不变氨基酸顺序完全一致; 另一部分是可变的氨

基酸顺序，这部分是同功蛋白质的种属差异的体现。

8． 球状蛋白。

【答案】球状蛋白是指多肽链所盘绕成的立体结构为程度不同的球状分子的一类蛋白质。

二、问答题

9． 还原性谷胱甘肽分子中的肽键有何特点? 还原性与氧化性谷胱甘肽的结构有何不同？

【答案】谷胱甘肽的一级结构如图所示：

图 全称为谷氨酰半胱氨酰甘氨酸。第一个肽键是由谷氨酸上的R 基团的羧基（不是通常肽键

形成的羧基参与）与第二个氨基酸（半胱氨酸）的氨基形成。第二个肽键属于正常肽键（半胱氨酸羧基与甘氨酸氨基形成）。

还原型谷胱甘肽由三个氨基酸构成，具有还原状态的巯基。氧化型谷胱甘肽是由2分子还原型谷胱甘肽通过半胱氨酸的巯基形成二硫键链接形成。

谷胱甘肽存在于动植物细胞，因其含有巯基，故常以GSH 来表示。是红细胞中的疏基缓冲剂。参与氧化还原过程，清除内源性过氧化物和自由基，维护蛋白质活性中心的巯基处于还原状态。

10．何谓高能化合物？举例说明生物体内有哪些高能化合物？

【答案】所谓高能化合物是指含有高能键的化合物，该高能键可随水解反应或基团转移反应而释放大量自由能。生物体内具有高能键的化合物是很多的，根据高能键的特点可以分成几种类型：

（1）磷氧键型

（2）氮磷键型

（3）硫酯键型

（4）甲硫键型

属于该型的化合物较多：①酰基磷酸化合物，如1，3-二磷酸甘油酸。如磷酸肌酸。 如酰基辅酶A 。 如S-腺苷蛋氨酸。 ②焦磷酸化合物，如无机焦磷酸。③烯醇式磷酸化合物，如磷酸烯醇式丙酮酸。

11．假定你决定从一种新的生物Streptococcus bartelium体内纯化核糖核酸酶，你选择盐析作为纯化的第一步，随着你JJnA 硫酸铵到细胞裂解物之中，进行分级分离。如果你添加的盐浓度是0.5mol/L、lmol/L、1.5mol/L、2mol/L、和2.5mol/L，你如何确定你要的蛋白质在哪一级分离沉淀之中？

如果你选择离子交换层析作为纯化核糖核酸酶的第二步，同样需要确定哪一部分含有目标蛋白。你会使用哪一种离子交换树脂? 为什么? 你如何从交换树脂中洗脱下你的目标蛋白？

你将纯化的蛋白质走SDS-PAGE ，在考马斯亮蓝染色以后，你看到一条单一的

种蛋白质是一种核糖体蛋白，于是你决定再进行一次蛋白质染色，这一次你发现了一条

小的条带。这一次染色方法是什么？为什么

会多显示出新的条带，你如何分离这两种蛋白质？

【答案】（1）在纯化蛋白质过程中，首先需要建立一种测定活性的方法。测定核糖核酸酶活性的方法是利用其将RNA 降解成单个核苷酸的活性。使用放射性标记的NTP ，可转录出带放射性标记的RNA 。以此作为核糖核酸酶的底物，将其与含有酶的部分保温，然后用TCA 沉淀，再使用特定的滤膜过滤，通过测定流过滤膜的带有同位素标记的核苷酸的放射性，可测定出纯化物中酶活性的高低。

（2）既然核糖核酸酶的底物是磷酸核糖骨架带负电荷的RNA , 核糖核酸酶本身很可能带正电荷。因此，可考虑阳离子交换树脂来纯化核糖核酸酶。在低盐浓度下上柱，以吸附核糖核酸酶，然后用高盐缓冲液洗脱出核糖核酸酶。

（3）考马斯亮蓝染色的灵敏度仅能检测出含有大约lOOng 的条带，而银染的灵敏度达10ng 。所以使用考马斯亮蓝染色看不到的条带有可能通过银染看到。

为了将的核糖体蛋白与的核糖核酸酶分开，可使用凝胶过滤层析。的核糖核酸酶应该先流出来。

12．在无抑制剂和有抑制剂存在下的反应速度与底物浓度的关系如下表：

大小的大条带。为了确定它是不是核糖核酸酶，你决定将条带切下，然后测序。然而，你吃惊的发现，这

（1）在无抑制剂和有抑制剂存在下

（2）是什么样的抑制类型？

【答案】（1）无抑制剂存在下

有抑制剂存在下

（2）竞争性抑制。

的值分别为多少？