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一、名词解释

1． 密码子（codon ）。

【答案】密码子又称三联体密码子，是由mRNA 上每三个相邻的核苷酸构成的密码子，每一个密码子决定一个 氨基酸。 2．

【答案】

3． 分段盐析。

【答案】分段盐析是指利用不同蛋白质盐析时所需盐浓度不同，逐渐増加中性盐（常用硫酸铵）的浓度，从而使不同蛋白质先后析出的方法。例如血清中加入50%

的析出，加入100%

的

4． 胆汁盐。

可使清蛋白析出。

可使球蛋白

是指核酸分子在发生热变性的时候，有一半双螺旋被破坏时候的温度。

【答案】胆汁盐（胆汁酸）是胆固醇主要排泄形式，胆固醇先转化为活化的中间体胆酰CoA ，然后再与甘氨酸（或牛磺酸）结合成甘氨（牛磺）胆酸，它们分泌到肠中，有助于脂质的消化和吸收。

5． 增色效应（hyperchromiceffect ）。

【答案】增色效应（hyperchromice ffect）是指核酸变性时由于高级结构被破坏，碱基暴露程

度增加而使得的光吸收值升高的现象。

6． 临近和定向效应。

【答案】临近效应是指在酶促反应过程中，底物在酶活性部位的累积，有研宄发现溶液中的

底物浓度为

而活性中心的底物浓度为lOOmol/L。定向效应是底物在活性中心的定向排

布，定向效应有利于反应的发生。

7． 金属激活酶。

【答案】金属激活酶是指有些金属离子虽为酶的活性所必须，但不与酶直接作用，而是通过底物相连接的一类酶。

8． 离子载体。

【答案】按照被动转运方式转运离子的小的疏水性分子，可溶于膜脂双层中。大部分离子载

体是微生物合成的，其中有些已被用作抗生素。离子载体包括载体性离子载体和通道形成性离子载体。

二、问答题

9． 大肠杆菌既可以通过光复活系统，也可以通过核苷酸切除修复系统来修复由紫外线照射产生的嘧啶二聚体，如何通过实验区分这两种机制？

【答案】切除修复需要将嘧啶二聚体切除掉，换上正常的胸苷酸，而光复活机制是通过光复

活酶直接破坏嘧啶二聚体的环丁烷环而修复嘧啶二聚体。因此可以用

标记的胸苷追踪修复过

程，如果出现在修复后的DNA 分子上，则修复的方式是切除修复，否则就是光复活机制。

10．如何通过实验证实在复制叉区域存在许多小片段（Okazaki 片段）？

【答案】用带标记的脱氧三磷酸核苷酸作为合成DNA 的原料，经过一段时间后，加入碱溶液使合成停止，检查 发现标记出现在小片段DNA 上，追踪标记发现带标记的DNA 分子质量相同而且在细胞DNA 中占较多的比例。

11．简述双向电泳的原理及应用。

【答案】

双向电泳技术结合了等电聚焦技术（根据蛋白质等电点进行分离）及A 质最有效的一种电泳手段。通常第一维电泳是等电聚焦，

在细管中（性电解质、

其等电点的不同进行分离。然后将凝胶从管中取出，

用含有

白质充分结合。将处理过的凝胶条放在焦凝胶中进入

的缓冲液处理

聚丙烯酰

胺凝胶电泳技术（根据蛋白质的大小进行分离）。这两项技术结合形成的双向电泳是分离分析蛋

）中加入含有两

使

与蛋

的脲及非离子型去污剂的聚丙烯酰胺凝胶进行等电聚焦，变性的蛋白质根据

聚丙烯酰胺凝胶电泳浓缩胶上，加入丙烯酰胺溶液或

的蛋白质从等电聚

熔化的琼脂糖溶液使其固定并与浓缩胶连接。在第二维电泳过程中，

结合

聚丙烯酰胺凝胶，在浓缩胶中被浓缩，在分离胶中依据其分子质量大小被分离。

这样各个蛋白质根据等电点和分子质量的不同而被分离、分布在二维图谱上。由于双向电泳具有很高的分辨率，它可以直接从细胞提取液中检测某个蛋白质。

12．称取25mg 蛋白酶配成25ml 溶液，取2ml 溶液测得含蛋白氮0.2mg ，另取0.1ml 溶液测酶活力，结果每小时可以水解酪蛋白产生1500g 酪氨酸，假定1

个酶活力单位定义为每分钟产生氨酸的酶量，请计算：

（1）酶溶液的蛋白浓度及比活；

（2）每克纯酶制剂的总蛋白含量及总活力。 【答案】（1）蛋白质浓度

_比活力（2

）总蛋白

酿

_ __

13．依序写出三羧酸循环中的酶。

【答案】

柠檬酸合酶、乌头酸酶、异柠檬酸脱氢酶、酮戊二酸脱氢酶系、玻珀酰琥珀酸脱氢酶、延胡索酸酶、苹果酸脱氢酶。

14．体内来自哪些代谢？如果缺乏

【答案】（1

）①氧化阶段由糖-5磷酸，

期间产生2

分子5分子己糖磷酸。

（2

）成和转化反应。

例如，

①脂肪酸、胆固醇及鞘氨醇等脂质的合成； ②Glu 及其他非必需氨基酸的合成；

③还原性谷胱甘肽及相关的含疏基蛋白或酶的合成；

④与

15．

计算的

单加氧酶系（辅酶是时

，

大约为2〜3,

而氨基的

的

羧基。在

）相关的生物转化及羟化反应等。

十肽所带的净电荷。

大约为9〜10。该肽只有三个可解离的基团，Ala

时，两个羧基将以

形式存在，

而这时

主要是为生物合成反应提供必需的还原当量，缺乏时将影响多种生物分子的合

②非氧化阶段通过异构酶、转酮酶和转醛酶等催化的分子重排反应将6分子戊糖磷酸转化成

开始，

经由

合成酶、

主要影响哪些生化过程？

主要来自磷酸戊糖途径，总反应可分为两个阶段：

脱氢酶和6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶连续脱氢脱羧核酮

【答案】

羧基的氨基呈

氨基，Glu

的羧基和

因此该十肽的净电荷为

16．在嘌呤核苷酸的从头合成中，5-磷酸核糖焦磷酸转酰胺酶是一种别构酶，它控制着嘌呤核苷酸合成的速 度，并且受终产物AMP 和GMP 的反馈抑制。嘌呤核苷酸也能通过补救途径合成。当E. coli在含有腺嘌呤核苷 的介质中生长时，嘌呤核苷酸的从头合成可因GMP 抑制而关闭。为什么？

【答案】腺嘌呤核苷可以降解成次黄嘌呤。次黄嘌呤可通过补救途径合成IMP , 这一反应是由次黄嘌呤—鸟嘌呤 磷酸核糖转移酶催化的。IMP 可转变成GMP 。GMP 水平的升高能抑制5-磷酸核糖焦磷酸转酰胺酶的活性，从而关闭嘌呤核苷酸的从头合成。这种调节的重要意义是：经补救途径合成的代谢物可以控制该代谢物经从头合成途径合成的程度。

三、论述题