2018年第二军医大学武警总医院306西医综合之生物化学考研基础五套测试题
● 摘要
一、名词解释
1． 选择性拼接（alternative splicing）。
【答案】选择性拼接是指同一种mRNA 前体的不同拼接方式。
2． 金属激活酶。
【答案】金属激活酶是指有些金属离子虽为酶的活性所必须，但不与酶直接作用，而是通过底物相连接的一类酶。
3． 氧化磷酸化。
【答案】氧化磷酸化是指在底物脱氢被氧化时，电子或氢原子在呼吸链上的传递过程中伴随ADP 磷酸化生成A TP 的作用。氧化磷酸化是生物体内的糖、脂肪、蛋白质氧化分解合成A TP 的主要方式。
4． 多级调节系统（multistage regulation system）。
【答案】多级调节系统是指真核基因表达可随细胞内外环境条件的改变和时间程序而在不同表达水平上精确调节的调节系统。
5． 酶的专一性。
【答案】酶的专一性是指酶对底物及其催化反应的严格选择性。通常酶只能催化一种化学反应或一类相似的反应。不同的酶具有不同程度的专一性，酶的专一性可分为三种类型：绝对专一性、相对专一性和立体专一性。
6． 辅酶Q 。
【答案】辅酶Q 在呼吸链中起传递氢作用，是一类递氢体，也是呼吸链中唯一的非蛋白组分。由于生物界广泛存在，又属于醌类化合物，故称泛醌（ubiquinone ，UQ ），不同来源的泛醌只是侧链（R ）异戊二烯单位的数目不同。
7．
【答案】（半胱谷氨酰胺）是由谷氨酸的Y-羧基与半胱氨酸的a-氨基缩合而成，这与蛋白质分子中的肽键不同。
8． 抗体酶（abzyme ）。
【答案】抗体酶即催化性抗体，是抗体的高度特异性与酶的高效催化性巧妙结合的产物，其
本质上是一类在可变区赋予了酶活性的免疫球蛋白。
二、问答题
9． 简述脂肪酸通过细胞膜（线粒体膜）的转运方式。
【答案】短或中长链的脂肪酸可容易地渗透通过线粒体内膜，但是更长链的脂肪酸就不能轻易透过其内膜。需要以肉碱（3-羟-4-三甲基铵丁酸）为载体，将脂肪酸以脂酰基形式从线粒体膜外转到膜内。线粒体内膜的两侧均有肉碱脂酰转移酶。
位于线粒体内膜外侧的肉碱脂酰转移酶催
化脂酰与极性的肉碱分子结合，
该反应使基团脱下，肉碱分子进行取代，生成的脂酰肉
脂酰即可在线粒体基质中碱通过线粒体内膜的移位酶穿过内膜。进入膜内侧的脂酰肉碱又经线粒体内膜内侧的肉碱脂酰转
移酶催化，
把脂酰基转移给线粒体内的
重新转变成脂酰 酶的催化下进行氧化，释放的肉碱经运送脂酰肉碱入基质的移位酶协助又回到线粒体外细胞质中。
10．一个正常的喂得很好的动物用标记甲基的乙酸静脉注射，几小时后动物死了，从肝脏中分离出糖原和甘油三酯，测定其放射性的分布。（1）预期分离得到的糖原和甘油三酯放射性的水平是相同还是不同？为什么？
（2）利用结构式指出甘油三酯中哪些碳原子被大量标记？
【答案】（1）动物不能净转变乙酸成糖，但能直接将乙酸转变成脂肪酸，后者将掺入到甘油三酯的合成中，因此酯类比糖类标记得多。虽然从乙酸不能净合成糖，
但
一些乙酸将进入三羧酸循环，
并将将在糖中出现，因为
提供给葡萄糖异生作用的前体库。
（2）在甘油三酯中，标记主要出现在脂酰链的间隔的位置上，如下式所示：
11．有人认为严格地说维生素D 不是一种维生素，你认为有道理吗？
【答案】有一定道理，因为维生素一般是指生物体内不能合成但是生物体正常生长所必需的一类微量有机物质，而人体及动物体内皮肤中含有7-脱氢胆固醇，可以在紫外线照射下转化为维生素D , 所以有人认为严格地说，维生素D 不是一种维生素。
12．先用巯基乙醇处理胰岛素使其二硫键断开，再移除巯基乙醇让二硫键重新形成；如果A 、B 两条肽链可以经由一或两个二硫键连接，总共有多少种不同的连接方式？
【答案】A 、B 两链分别有4个和2
个通过一个二硫键将两链连接会有4×2=8种；形成两个二硫键连接则有4×3=12种，故总共有8+12=20种不同的连接方式。
13．有一蛋白质，在某组织内含量很低，很难分离提纯，现已知其相对分子质量，并从其他实验室要来该蛋白质的抗体，问用哪些实验方法可以初步证实组织内的确含有该蛋白质？
【答案】先根据这种蛋白质的分子质量，选用一定浓度的聚丙烯酰胺作用分离胶，用SDS-PAGE 分离从该组织中提取到的蛋白质。然后，用蛋白质印迹技术，转移到特定类型的薄膜
上，最后用酶联抗体进行检测，观察一种分子质量的蛋白质条带是否呈阳性反应。如果呈阳性反应，则初步证实组织内的确含有该蛋白质。
14．为什么乙酰CoA 特别适合于用作丙酮酸羧化酶的激活剂？
【答案】丙酮酸羧化酶只有在乙酰CoA 浓度升高时才能被激活。一方面，当细胞的能量需求因缺乏草酰乙酸而不能被满足时，乙酰CoA 的富集即可激活丙酮酸羧化酶以催化回补反应生成草酰乙酸；另一方面，当乙酰CoA 浓度因细胞的能量需求已被满足而升高时，丙酮酸将经由糖异生途径生成葡萄糖，而该转化的第一步反应正是丙酮酸羧化成草酰乙酸。
15．有A 、B 、C 三种不同蛋白质，在pH7进行电泳，结果如图所示。若在pH7用中性盐沉淀这三种蛋白质，哪种蛋白质首先沉淀？哪种次之？哪种最后？
图
【答案】从电泳结果可知pH7时蛋白质C 带的电荷最多，蛋白质B 其次，蛋白质A 最少。pH7用中性盐沉淀时，电荷带得最少的首先沉淀，所以蛋白质A 首先沉淀，其次是蛋白质B ，最后是蛋白质C 。
16．简述的方法和意义。
标记的【答案】将聚丙烯酰胺凝胶电泳的变性DNA 片段转移到硝酸纤维素薄膜上，再与
变性DNA 探针进行杂交。
三、论述题
17．请写出三种测定蛋白质含量的方法名称，并进一步写出其中一种的测定原理。
【答案】蛋白质含量的测定方法：双缩脲法、凯氏定氮法、Folin-酚法、紫外吸收法、胶体金结合法、考马斯亮蓝法。
（1） Folin-酌法（Lowry 法）：Lowry 法是双缩脲法的发展，在碱性条件下，蛋白质中的肽
Folin-酚试剂中的磷钼酸盐一磷钨酸盐被蛋白质中的酪氨酸和苯丙氨酸残键与铜结合生成复合物。
基还原，产生深蓝色（钼兰和 钨兰的混合物）。在一定的条件下，蓝色深度与蛋白质含量成正比。
（2）考马斯亮蓝染色法：考马斯亮蓝G250能与蛋白质的疏水微区相结合。考马斯亮蓝G250的磷酸溶液呈 棕红色，最大吸收峰在465 mn，当它与蛋白质结合后形成的蛋白质-染料复合物有很高的消光效应，导致了蛋白 质定量测定的高敏感度。
（3）紫外吸收法：蛋白质中酪氨酸和色氨酸残基的苯环含有共轭双键，在280nm 处有吸收峰，且吸收值与其含量呈正比关系。
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