2018年北京市培养单位高能物理研究所610分子生物学之现代分子生物学考研强化五套模拟题
● 摘要
一、名词解释
1. 基因组学
【答案】基因组学是指研究生物基因组和如何利用基因的一门科学,研究目标是认识基因组的结构、功能及进化, 弄清基因组包含的遗传物质的全部信息及相互关系。
2. 穿梭载体(shuttle vector)
【答案】穿梭载体是指具有多个复制子能在两个以上的不同宿主细胞复制和繁殖的载体。
3. Transcriptome
【答案】转录组。转录组是指一个活细胞所能转录出的所有niRNA ,即基因组DNA 转录的基因总和。研究转录组的一个重要方法是利用DNA 芯片技术检测机体中基因组的表达。
4. 编码链(coding strand)
【答案】编码链是指DNA 双链中含编码蛋白质序列的那条链,与模板链互补,也称有义链(sensestrand )或正链。其序列与信使核糖核酸相同,只是信使核糖核酸中的U (尿嘧啶)组成与编码链中的T (胸腺嘧啶)组成相区别。
5. 顺式作用元件
【答案】顺式作用元件是指与结构基因表达调控相关、能够被基因调控蛋白特异性识别并结合的特异DNA 序列,包括启动子、上游启动子元件、增强子、沉默子等。
6. DNA Fingerprint
DNA 指纹是指由于限制性酶切位点的改变或DNA 序列中重复序列等原【答案】DNA 指纹。
因,以及一些DNA 遗传标记的差异性,生物个体DNA 表现的个体间的差异,这些个体差异反映了个体的身份。利用DNA 指纹鉴定个体差异的技术为DNA fingerprinting,用于亲子鉴定。
7. 转座子
【答案】转座子是指存在于染色体DNA 上可自主复制和移位的基本单位,介导遗传物质的重排,即转座。
8.
【答案】泛素(遍在蛋白)。泛素是指一种存在于大多数真核细胞中,主要功能是标记需要
分解掉的蛋白质,使其被水解的小蛋白。
9. 等电聚焦
【答案】
等电聚焦是指利用蛋白质分子或其他两性分子的等电点的不同,在一个稳定的、连续的、线性pH 梯度中进行蛋白质的分离和分析的技术。
10. 【答案】即荧光原位杂交技术(fluorescence in situ hybridization ),是指一种利用非放射性的劳光信号对原位杂交样本进行检测的技术。它将荧光信号的高灵敏度、安全性,荧光信号的直观性和原位杂交的高准确性结合
起来,通过荧光标记的DNA 探针与待测样本的DNA 进行原位杂交,在荧光显微镜下对荧光信号进行辨别和计数,从而对染色体或基因异常的细胞、组织样本进行检测和诊断,为各种基因相关疾病的分型、预前和预后提供准确的依据。
二、简答题
11.真核生物RNA 的转录后加工及其意义。
【答案】(1)RNA 转录后加工有:
①减少部分片段:如切除5' 端前导序列、3' 端拖尾序列和中部的内含子;
②增加部分片段:5' 加帽,3' 加polyA ,通过归巢和编辑加入一些碱基;
③修饰:对某些碱基进行甲基化等。
(2)RNA 转录后加工的意义:
①RNA 转录后的一系列加工可使RNA 转录后的初产物变成成熟的、有功能的RNA ;
②有些加工可改变RNA 携带的遗传信息,有利于生物的进化,是对“中心法则”的校正和补充。
12.鸟枪测序法的技术原理是什么?
【答案】鸟枪法测序的基本原理:随机挑选带有基因组DNA 的质粒做测序反应,然后在计算机的帮助下,运用一些基于图论的近似算法进行序列拼接。
13.真核mRNA 有哪些转录后修饰事件?详细叙述大部分真核mRNA 3'端的修饰过程。
【答案】(1)真核mRNA 转录后修饰事件有:
①5' 端形成特殊的帽子结构;
②在链的Y 端切断并加上多聚腺苷酸poly (A )尾巴;
③通过拼接去除内含子转录而来的序列;
④链内部核苷被甲基化;
⑤发生RNA 编辑和再编码。
(2)大部分真核mRNA 31端的修饰过程:首先由核酸内切酶切开mRNA 3'端的特定部位,然后由poly (A ) 合成酶催化多聚腺哲酸反应,加入poly (A )尾巴。加poly (A )位点上游10~35个核苷酸处有AAUAAA 序列,下 游约50核苷酸处有富含GU 序列,这两处序列是剪切和加poly (A )所需的信号。首先由剪切和聚腺苷化特异因 子(CPSF )结合到上游富含AAUAAA 序列,剪除刺激因子(CSF )与下游富含GU 序列作用,剪除因子(CF ) I 、II 相继与之结合,使其更趋稳定。在剪除之前,poly (A )聚合酶结合到复合物上,使剪切后游离的能迅速 腺苷酸化。
14.什么是信号肽?它在序列组成上有哪些特点?有什么功能?
【答案】(1)信号肽是指存在于蛋白多肽链上的在起始密码子之后能启动蛋白质运转的一段多肽序列。该序列常 常位于蛋白质的氨基末端,长度一般在13〜36个残基之间。
(2)信号肽在序列组成上的特点有:
①一般带有10〜15个疏水氨基酸;
②常常在靠近该序列N-端疏水氨基酸区上游带有1个或数个带正电荷的氨基酸;
③在其C-末端靠近蛋白酶切割位点处常常带有数个极性氨基酸,离切割位点最近的那个氨基酸往往带有很短的侧链(丙氨酸或甘氨酸)。
(3)信号肽的功能
根据信号肽假说,当分泌蛋白的翻译进行到50-70个氨基酸残基之后,信号肽开始从核糖体的大亚基露出, 被糙面内质网膜上的受体识别,并与之相结合。信号肽过膜后被内质网腔的信号肽酶水解,正在合成的新生肽随 之通过蛋白孔道穿越疏水的双层磷脂。一旦核糖体移到mRNA 的终止密码子,蛋白质合成即告完成,翻译体系 解散,膜上的蛋白孔道消失,核糖体重新处于自由状态。
因此信号肽的功能是负责把蛋白质引导到细胞内不同膜结构的亚细胞器内。
15.说出凝胶滞缓实验的原理与应用。
【答案】(1)基本原理
蛋白质可以与DNA 结合后将大大增加其相对分子质量,而凝胶电泳中DNA 朝正电极移动的距离与其相对 分子质量的对数成正比,因此,没有结合蛋白的DNA 片段跑得快,而与蛋白质形成复合物的DNA 由于受到阻 滞而跑得慢。
(2)应用
①用于研究与蛋白质相结合的DNA 序列的特异性;
②用于确定带有放射性标记的DNA 分子中与蛋白直接发生相互作用的关键性碱基。
16.有一个研究生想使他所感兴趣的一个大肠杆菌的基因严格受碳源控制,在葡萄糖供应时,该基因不表达;当供应乳糖时,该基因大量表达。你如何帮助他实现这种想法?依据是什么?
【答案】依据条件启动子对下游基因的调控机理,将乳糖操纵子的启动子元件(包括上游阻