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一、名词解释

1． cDNA 文库（cDNA library）。

【答案】以mRNA 为模板，利用反转录酶合成与mRNA 互补的DNA 称为cDNA , 单链的eDNA 再复制双链的 DNA 片段，与适当的载体连接后，转入受体菌，所建立的文库称为cDNA 文库。

2． 变构酶。

【答案】有些酶除了活性中心外，还有一个或几个部位，当特异性分子非共价地结合到这些部位时，可改变酶的构象，进而改变酶的活性，酶的这种调节作用称为变构调节（allosteric regulation ）, 受变构调节的酶称变构酶 （allosteric enzyme），这些特异性分子称为效应剂（effector ）。变构酶分子的组成一般是多亚基的。分子中凡与 底物分子相结合的部位称为催化部位（catalytic site ），凡与效应剂相结合的部位称为调节部位（regulatory site ）， 这二部位可以在不同的亚基上，或者位于同一亚基。

3． 蛋白质等电点。

【答案】当溶液在某一定的环境中，使蛋白质所带的正电荷与负电荷恰好相等，即净电荷

称为蛋白质等电为零，在电场中，蛋白质分子既不向阳极移动，也不向阴极移动，这时溶液的

点。

4． 密码子的兼并性（degenerate ）。

【答案】密码子的兼并性是指大多数氨基酸都有两种以上的密码子，不同密码子编码同一种氨基酸的这种性质。

5． 半必需氨基酸。

【答案】半必须氨基酸是一类人体可以合成，可维持成人蛋白质合成的需要，但对正在成长的儿童来说，生长旺盛，蛋白质合成旺盛，对氨基酸的需要量大，自身合成的氨基酸不能满足需要，必须从食物中摄取作为补充的氨基酸，如组氨酸。

6． 米氏方程。

【答案】米氏方程是指表示一个酶促反应的起始速度（V ）与底物浓度（[S]）关系的动力学

方程

它是在稳态理论基础上推导得出的。

7． 金属激活酶。

【答案】金属激活酶是指有些金属离子虽为酶的活性所必须，但不与酶直接作用，而是通过底物相连接的一类酶。

8． 酶的辅助因子。

【答案】酶的辅助因子构成全酶的一个组分，主要包括金属离子及水分子有机化合物，主要作用是在酶促反应中运输转移电子、原子或某些功能基的作用。

二、问答题

9． 你如何解释以下现象：细菌调节嘧啶核苷酸合成的酶是天冬氨酸-氨甲酰转移酶，而人类调节调节嘧啶核苷酸合成的酶主要是氨甲酰磷酸合成酶。

【答案】氨甲酰磷酸合成酶参与两种物质的合成：嘧啶核苷酸的合成和精氨酸的合成（或尿素循环）。在细菌体 内，这两种物质的合成发生在相同的地方（细菌无细胞器），如果调节嘧啶核苷酸合成的酶是此酶的话，对嘧啶 核苷酸合成的控制将会影响到精氨酸的正常合成。而人细胞有两种氨甲酰磷酸合成酶，一种定位于线粒体内，参与尿素循环或精氨酸的合成，另一种定位于细胞质，参与嘧啶核苷酸合成。

10．甘油醛-3-磷酸脱氢酶（为150000）的活性位点有一个Cys 残基，假定为使5ml 蛋白质含量为1.2mg/ml的酶完全失活，需要

【答案】⑴

11．原核生物和真核生物的mRNA 分别有什么样的结构特征使其能同小亚基结合？

【答案】在原核生物mRNA 起始密码子之前的前导顺序中，有一段富含嘌呤的核苷酸顺序，位于起始密码子之 前约10个核苷酸处，即SD 顺序，它能与30S 核糖体亚基中的

一段富含嘧啶的核苷酸顺序互补，使mRNA 与30S 亚基能够在特定位点结合。此外，

子AUG

离该分子

亚基同端很近，

不太可能存在与端能促进 , 计算酶的催化亚基的数目。碘乙酰胺（Mr 为185）

这种结合。真核生物的mRNA 没有发现类似的SD 顺序，并且许多真核生物mRNA 的起始密码端互补的顺序。实验证明，

真核生物的参与。这就说明端的帽子结构40S 端的“帽子”结构是翻译起始不可缺少的。如果“帽子”丢失，翻译就不能起始。已证明，端的结合需要帽子结合蛋白

是40S 亚基结合所需要的主要结构特征。

12．怎样通过实验证实DNA 复制是双向复制还是单向复制？

【答案】通过放射自显影的方法确定。在复制开始时将E.

放在含低放射强度

培养基中生长，

的

数分钟后，移置含高放射性强度3H-脱氧胸苷的培养基中生长；经过一段时间后，进行放射自显影。在图像上可以看到，复制起始区的放射性标记密度低，感光还原的银颗粒密度低；继续的合成区放射性标记密度高，银颗粒 密度高。若中间密度低，两端密度高，则DNA 的复制为双向；如果起始部位既有高密度也有低密度，就表明 DNA 的复制为定点单向。研宄证明多数细胞的DNA 的复制为定点双向。但也有一些例外，如噬菌体质粒和真核细胞的线粒体等DNA 为单向复制。

13．溶液A 中含有浓度为lmol/L的20个碱基对的DNA 分子，溶液B 中含有0.05mol/L的400个碱基对的DNA 分子，所以每种溶液含有的总的核苷酸残基数相等。假设DNA 分子都有相同的碱基组成。

（1）当两种溶液的温度都缓慢上升时，哪个溶液首先得到完全变性的DNA?

（2）哪个溶液复性的速度更快些？

【答案】（1）溶液A 中的DNA 将首先被完全变性，因为在20个碱基对螺旋中的堆积作用力比在400个碱基对螺旋中的力小很多，在DNA 双链的末端的DNA 的碱基对只是部分堆积。在片段短的分子中这种“末端效应”

更大。

（2）在溶液A 中复性的速率更大。成核作用（第一个碱基对的形成）是一个限速步骤，单链分子的数目越大，重新形成碱基对的概率就越大，因而在溶液A 中的DNA （含有2mol/L单链DNA ）将比溶液B 中的DNA （含有0.1mol/L单链DNA ）更快地复性。

14．有一蛋白质，在某组织内含量很低，很难分离提纯，现已知其相对分子质量，并从其他实验室要来该蛋白质的抗体，问用哪些实验方法可以初步证实组织内的确含有该蛋白质？

【答案】先根据这种蛋白质的分子质量，选用一定浓度的聚丙烯酰胺作用分离胶，用SDS-PAGE 分离从该组织中提取到的蛋白质。然后，用蛋白质印迹技术，转移到特定类型的薄膜上，最后用酶联抗体进行检测，观察一种分子质量的蛋白质条带是否呈阳性反应。如果呈阳性反应，则初步证实组织内的确含有该蛋白质。

15．简述嘌呤霉素对多肽合成的抑制作用。

【答案】嘌呤霉素的结构与酷氨酰端上的残基的结构十分相似。它能合核糖体A

上的肽酰基，形成肽酰嘌呤霉素，但其位结合，并能在肽酰转移酶的催化下。接受P

位肽酰

断。

许多蛋白质合成抑制剂具有高度专一性，特别是抗生素，在蛋白质合成研宄中是一个有力的工具。这类抑制剂都能特异地抑制蛋白质合成的某个步骤，由此可以阐明蛋白质生物合成的机制。嘌呤霉素是酪氨酰

的类似物，具有某种竞争抑制的性质。 联建不是酯键而是酰肽键。肽酰-嘌呤霉素复合物很易从核糖体上脱落，从而使蛋白质合成过程中